DPBS vs PBS
PBS ehk fosfaatpuhverdatud soolalahus ja Dulbecco fosfaatpuhverdatud soolalahus (DPBS) on puhverdatud soolalahused, mida kasutatakse bioloogilistes uuringutes. Rakke hõlmavates teadusuuringutes kasutatakse PBS ja DPBS. Lahuse ioonide kontsentratsioon ja osmolaarsus on isotoonilised, see tähendab, et see sobib inimese kehaga. Puhver hõlbustab stabiilse pH 7,2-7,6 saavutamist ja säilitamist.
PBS-i ja DPBS-i vahel pole olulist erinevust. Mõlemad sisaldavad naatriumfosfaati, naatriumkloriidi ja vajadusel ka kaaliumfosfaati ja kaaliumkloriidi. Muud valmistised, näiteks DPBS, võivad sisaldada või mitte sisaldada kaltsiumi ja magneesiumi. PBS ja DPBS on arvukalt rakendusi, kuna need pole rakkudele kahjulikud. Rakkudega saastunud instrumentide või mahutite loputamiseks saab kasutada nii PBS-i kui ka DPBS-i. Mõlemat saab kasutada ka ainete lahjendamisel. Lahjendusvedelikes nagu valk sisalduvad veemolekulid peatatakse ja kuivatatakse. Ainega ühinev vesi hoiab ainet konformatsiooniliste muutuste, näiteks denaturatsiooni muutuste eest. Kaltsiumi ja magneesiumi lahused võivad trüpsiini aktiivsust piirata. Ellipsomeetrias saab valgu adsorptsiooni mõõta, võttes PBS-i kasutades põhispektrit.
Ühendatud rakkude eraldamiseks võib kasutada fosfaatpuhverdatud soolalahust koos lisaainetega nagu EDTA. Sade moodustub, kui PBS-ile lisatakse kahevalentset metalli tsinki, mistõttu seda ei saa lahutatud rakkudesse lisada. Sellist tüüpi olukorras kasutatakse tsingi asemel puhvrit.
Fosfaatpuhverdatud soolalahus ja Dulbecco fosfaatpuhverdatud soolalahus valmistatakse mitmel viisil. Üks viis selle valmistamiseks on 800 g lahustamine. naatriumkloriid, 20 g. kaaliumkloriid, 2 molekuli vett, 24 g. kaaliumfosfaat ja 144 g. naatriumfosfaat 8 liitris destilleeritud vees. Tulemuseks on 10 liitrit 10x PBS-i. Puhverdatud lahuste valmistamisel mõõta otse pH-mõõturit kasutades PBS-i pH. Lahuse pH-d saab reguleerida naatriumhüdroksiidi või soolhappe abil. Fosfaatpuhverdatud soolalahus lahjendusvedelikuna valmistatakse lõppkontsentratsiooniga 10 mM fosfaati, 137 mM naatriumkloriidi, 2,7 mM kaaliumkloriidi ja pH 7,4. Fritschil, Sambrookil ja Maniatisel on oma tee puhverlahuste ettevalmistamiseks oma tee pealkirjaga “Molecular Cloning”. Vastavalt sellele alustage 1x PBS-i liitri kohta valmistist 800 ml-ga. destilleeritud vett. Kaasa 8 g. naatriumkloriidi ja 0,2 g. kaaliumkloriidi. 1,44 g. Seejärel lisatakse naatriumfosfaat ja seejärel 0,24 g. kaaliumfosfaat. Pange soolhape, et reguleerida pH väärtuseni 7,4. 1 liitri PBS-i saamiseks lisage veel destilleeritud vett, kuni tase on 1 liitrit. Saadud lahus lahutatakse alikvootiks ja lahuse steriliseerimiseks kasutatakse autoklaavi. Reguleerige autoklaav temperatuurini 121 ° C ja autoklaavige 20 minutit vedelikutsüklis. Seejärel hoidke lahust toatemperatuuril.
Ehkki fosfaatpuhverdatud soolalahust ja Dulbecco fosfaatpuhverdatud soolalahust valmistatakse mitmel viisil, on sisu endiselt sama. Seetõttu, hoolimata sellest, kuidas seda valmistatakse, on tulemused ja kasutusalad samad.
Kokkuvõte:
1.PBS ehk fosfaatpuhverdatud soolalahus ja Dulbecco fosfaatpuhverdatud soolalahus (DPBS) on puhverdatud soolalahused, mida kasutatakse bioloogilistes uuringutes.
2.Lahuse ioonide kontsentratsioon ja osmolaarsus on isotoonilised, see tähendab, et see sobib inimkehaga. Puhver hõlbustab stabiilse pH 7,2-7,6 saavutamist ja säilitamist.
3.PBS-i ja DPBS-i vahel pole olulist erinevust. Mõlemad sisaldavad naatriumfosfaati, naatriumkloriidi ja vajadusel ka kaaliumfosfaati ja kaaliumkloriidi. Muud valmistised, näiteks DPBS, võivad sisaldada või mitte sisaldada kaltsiumi ja magneesiumi.
4.Mõlemat PBS-i ja DPBS-i saab kasutada rakkudega saastunud instrumentide või konteinerite loputamiseks. Mõlemat saab kasutada ka ainete lahjendamisel. Lahjendusvedelikes nagu valk sisalduvad veemolekulid peatatakse ja kuivatatakse. Ainega ühinev vesi hoiab ainet konformatsiooniliste muutuste, näiteks denaturatsiooni muutuste eest. Kaltsiumi ja magneesiumi lahused võivad trüpsiini aktiivsust piirata. Ellipsomeetrias saab valgu adsorptsiooni mõõta, võttes PBS-i kasutades põhispektrit.
5.Komplekteeritud rakkude eraldamiseks võib kasutada fosfaatpuhverdatud soolalahust koos lisaainetega nagu EDTA. Sade moodustub, kui PBS-ile lisatakse kahevalentset metalli tsinki, mistõttu seda ei saa lahutatud rakkudesse lisada. Sellist tüüpi olukorras kasutatakse tsingi asemel puhvrit.
6.PBS ja DPBS valmistatakse mitmel viisil. Ehkki fosfaatpuhverdatud soolalahust ja Dulbecco fosfaatpuhverdatud soolalahust valmistatakse mitmel viisil, on sisu endiselt sama. Seetõttu, hoolimata sellest, kuidas seda valmistatakse, on tulemused ja kasutusalad samad.