Rakuliin on püsivalt rajatud rakukultuur, mida saab eritingimustes paljundada ja kasvatada. Uurimise hõlbustamiseks hoitakse rakuliinidena mitut rakuliini, näiteks vähi rakuliinid, hepatotsüüdid ja luuüdi rakud. Rakuliinid valmistatakse primaarsetest kultuuridest ja need võivad olla peamiselt kahte tüüpi, nimelt kleepuvad rakukultuurid ja suspensioonrakukultuurid. Seega nimetatakse nendest kultuuridest saadud rakuliinid kleepuvateks rakuliinideks ja suspensiooni rakuliinideks. Adherentsed rakuliinid on rakuliinid, milles primaarsed kultuurid on kinnitatud kindlale alusele ja seega on nad kinnituspunktist sõltuvad rakud. Suspensiooni rakuliinid on rakuliinid, milles kultuurid suspendeeritakse vedelas keskkonnas ja rakud jäävad seega vedelasse keskkonda. Nad ei sõltu kinnituspunktidest. võtme erinevus Adherentsete ja suspensioonsete rakuliinide vahel on rakkude kinnitussõltuvus. Kleepuvad rakuliinid vajavad selle kasvu jaoks tugevat tuge, seega sõltuvad kinnituspunktist, samas kui suspensiooni rakuliinid on kinnituspunktist sõltumatud ja ei vaja kasvu toetamiseks tugevat tuge.
1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on kleepuvad rakuliinid?
3. Mis on suspensioonrakkude read
4. Nakkuvate ja vedrustusrakkude joonte sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - kleepuv vs suspensioonrakkude rida tabelina
6. Kokkuvõte
Adherentsed rakuliinid on rakuliinid, mis on kinnituspunktist sõltuvad. Seetõttu vajavad need rakuliinid nende kasvu jaoks stabiilset tuge. Enamik ekstraheeritud selgroogsetest rakkudest (välja arvatud vereloomerakud) on kinnituspunktist sõltuvad. Seetõttu kultiveeritakse enamik selgroogseid rakke koos adhesiooniga, mis tagab rakkude ühtlase kasvu.
Enamik kleepuvatest rakuliinidest paiknevad koekultuuriga töödeldud anumas ja nende kasv on piiratud veresoone või sellega kleepuva alaga. Rakkude töötlemisel kleepuva rakuliini kasvatamiseks tuleks rakud dissotsieerida trüpsiinimise teel ja seejärel rakendada kleepuvate rakuliinide määramiseks korduvaid passaažimeetodeid. Liimitud kultuuridest valmistatud rakuliinide üldised rakendused on tsütoloogias ja tsütogeneetikas. Neid kasutatakse ka teadustööks.
Suspensiooni rakuliinid on kinnituspunktist sõltumatud. Need on saadud suspensioonikultuurist, mis võib hõlpsalt hõljuda suspendeeritud vedelas keskkonnas. Suspensiooni rakukultuure tuleb kasvu jätkamiseks pidevalt loksutada. Inimese vereloome rakke kultiveeritakse peamiselt suspensioonikultuuridena ja neid hoitakse suspensiooni rakuliinidena, kui neid kasutatakse teaduseesmärkidel.
Suspensioonrakuliinide hooldamine nõuab pidevat loksutamist ja väheseid läbimisprotseduure. Suspensioonrakkude kasvu piirab rakkude kontsentratsioon söötmes. Seega aja jooksul kahandavad kasvufaktorid ja söötme koostisosad rakkude kasvu piiramist.
Joonis 01: Pseudomonas spp. Suspensioonikultuur
Suspensioon-rakuliinid on kaubanduslikus tootmises kõige laialdasemalt kasutatav primaarsete rakuliinide tüüp. Enamikku mikroobrakke hoitakse suspensioonrakkudena, kus neid kasutatakse kasulike sekundaarsete metaboliitide, näiteks antibiootikumide, vitamiinide, aminohapete ja valkude ekstraheerimiseks. Suspensioonrakuliinide kultuurid annavad palju kõrgemaid saadusi kui nakkunud rakuliinid ning need on vähem töömahukad ja vajavad vähem kulusid võrreldes kleepuvate rakuliinidega.
Adherent vs suspensioonrakkude read | |
Adherentsed rakuliinid on rakuliinid, milles primaarsed kultuurid kinnituvad tahkele alusele. | Suspensiooni rakuliinid on rakuliinid, milles kultuurid suspendeeritakse vedelas keskkonnas ja rakud jäävad seega vedelasse keskkonda. |
Kinnituspunktide sõltuvus | |
Adherentsed rakuliinid on kinnituspunktist sõltuvad. | Suspensiooni rakuliinid on kinnituspunktist sõltumatud. |
Agitatsioon | |
Liimitud rakuliinid ei vaja segamist. | Suspensiooni rakuliinid vajavad segamist. |
Trüpsiinimine | |
Trüpsiinimine toimub kleepuvates rakuliinides. | Suspensiooni rakuliinides trüpsiinimist ei esine. |
Koekultuuriga töödeldud anumad | |
Nõutav kleepuvates rakuliinides. | Suspensiooni rakuliinides ei nõuta. |
Saagis | |
Liimitud rakuliinid annavad madalama saagise. | Suspensiooni rakuliinid annavad suurema saagise. |
Rakuliinide säilitamine on oluline protsess nii loomade rakukultuuride kui ka taimede kudede kultuuride kasvatamisel. Lisaks säilitatakse rakuliinid ka mikroobsete rakkude jaoks, mida kasutatakse laialdaselt tööstuslikes protsessides. Rakuliine võib nimetada kas kleepuvateks rakuliinideks või suspensioonideks rakuliinideks. Liimitud rakuliinid on saadud kleepuvatest primaarsetest rakukultuuridest ja nad on kinnituspunktist sõltuvad. Suspensiooni rakuliinid on saadud suspensiooni primaarsetest rakukultuuridest. Need rakud eksisteerivad vedelas keskkonnas ja rakkude kasvuks on vajalik pidev raputamine. See on erinevus kleepuvate rakuliinide ja suspensiooni rakuliinide vahel.
1. “Kindel rakukultuur vs suspensioonrakkude kultuur.” Thermo Fisher Scientific. Saadaval siin
2. Lonza, primaarsed rakud vs rakuliinid. Saadaval siin
1. 'Pseudomonas aeruginosa pyocyanin' autor Y tambe, (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedia kaudu