Erinevus afiinsuse ja ioonivahetuskromatograafia vahel

võtme erinevus afiinsuse ja ioonivahetuskromatograafia vahel on see võime segus laetud või laadimata komponentide eraldamiseks kasutada afiinsuskromatograafiat, samas kui segu laetud komponentide eraldamiseks võib kasutada ioonvahetuskromatograafiat.

Kromatograafia on tehnika, mida saame kasutada segu komponentide eraldamiseks. Seal on erinevaid tüüpe, nagu vedelikkromatograafia, gaasikromatograafia jne. Afiinsuskromatograafia ja ioonvahetuskromatograafia on vedelikkromatograafia kaks alamkategooriat. Nendes tehnikates on ka kaks faasi. Nimelt on need statsionaarne ja liikuv faas. Nende meetodite eesmärk on eraldada liikuvas faasis komponendid statsionaarse faasi pinnale sõltuvalt komponentide sidumisest..

SISU

1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on afiinsuskromatograafia
3. Mis on ioonvahetuskromatograafia
4. Kõrvuti võrdlus - afiinsus vs ioonvahetuskromatograafia tabelina
5. Kokkuvõte

Mis on afiinsuskromatograafia?

Afiinsuskromatograafia on biokeemiline tehnika, mida kasutame segu komponentide eraldamiseks sõltuvalt nende komponentide vastastikmõjust.

Sel juhul kasutatavad interaktsioonid hõlmavad järgmist:

1. Antigeeni ja antikeha interaktsioonid
2. Ensüümi ja substraadi interaktsioonid
3. Retseptori ja ligandi interaktsioonid
4. Valgu-nukleiinhappe interaktsioonid

Selles tehnikas kasutame selle eraldamise tehnika jaoks molekulide molekulaarseid omadusi. Siin lubame soovitud ühendil suhelda statsionaarse faasiga vesiniksideme, ioonse interaktsiooni, disulfiidsildade, hüdrofoobse interaktsiooni jne kaudu. Molekulid, mis ei interakteeru statsionaarse faasiga, elueeruvad kõigepealt. Seega saame selle segust eraldada. Soovitud ühend püsib statsionaarses faasis. Seetõttu võime selle eraldada, kasutades elueerivat lahustit, ja elueerida ka eraldamiseks.

Joonis 01: kromatograafiline kolonn

Afiinsuskromatograafia on kasulik puhastamiseks ja aine kontsentreerimiseks segust puhverlahuse abil. Samuti on see abiks segu soovimatute ainete vähendamisel. Selle seadme jaoks kasutatava aparaadi kaalumisel peaksime kasutama statsionaarses faasis täidetud kolonni. Seejärel peaksime laadima liikuva faasi, mis sisaldab biomolekule, mida me eraldame. Järgmisena laske neil siduda statsionaarse faasiga. Seejärel saame pesupuhvri abil mittesihtmärgiks olevad biomolekulid eraldada, kuid eraldusprotsessi õnnestumiseks peaks sihtmolekulidel olema kõrge afiinsus statsionaarse faasi suhtes.

Mis on ioonvahetuskromatograafia?

Ioonkromatograafia on vedelikkromatograafia vorm, milles saame ioonseid aineid analüüsida. Sageli kasutame seda anorgaaniliste anioonide ja katioonide (st kloriidi ja nitraadi anioonide ning kaaliumi, naatriumi katioonide) analüüsimiseks. Kuigi see on vähem levinud, võime analüüsida ka orgaanilisi ioone. Lisaks võime seda tehnikat kasutada valkude puhastamiseks, kuna valkudel on molekulid laetud teatud pH väärtuste korral. Siin kasutame tahket statsionaarset faasi, mille külge laetud osakesed saavad kinnituda. Tahke kandjana võime kasutada näiteks vaigu polüstüreen-divinüülbenseeni kopolümeere.

Joonis 02: ioonvahetuskromatograafia faasid

Selle edasiseks selgitamiseks on statsionaarses faasis fikseeritud ioonid nagu sulfaatioonid või kvaternaarsed amiinikatioonid. Kõik need peaksid olema seotud vastasiooniga (vastassuunalise laenguga ioon), kui tahame säilitada selle süsteemi neutraalsust. Kui vastasioon on katioon, siis nimetame seda süsteemi katioonivahetusvaikuks. Kuid kui vastasioon on anioon, on süsteem anioonvahetusvaik.

Ioonivahetusprotsessis on viis peamist faasi;

1. Algstaadium
2. Sihtmärgi adsorptsioon
3. Elueerimise algus
4. Elueerimise lõpp
5. Taastumine

Mis vahe on afiinsusel ja ioonivahetuskromatograafial?

Afiinsuskromatograafia on biokeemiline tehnika, mida kasutame segu komponentide eraldamiseks sõltuvalt nende komponentide vastastikmõjust, samas kui ioonkromatograafia on vedelikkromatograafia vorm, milles saame ioonseid aineid analüüsida. Seetõttu on afiinsuse ja ioonvahetuskromatograafia peamine erinevus selles, et ioonvahetuskromatograafiat saame kasutada ainult ioonsete ainete eraldamiseks, samas kui afiinsuskromatograafia on võimeline eraldama nii laetud kui ka laadimata osakesi. Tööpõhimõtte kaalumisel on afiinsuse ja ioonivahetuskromatograafia erinevus selles, et afiinsuskromatograafia toimub tänu sellele, et sihtmolekulidel on kõrge afiinsus statsionaarse faasi suhtes. Ioonivahetuskromatograafia jaoks on sihtmolekulidel statsionaarse faasi pinnaga vastupidine laeng.

Allpool toodud infograafik näitab afiinsuse ja ioonvahetuskromatograafia erinevust kõrvuti võrdlusena.

Kokkuvõte - afiinsus vs ioonvahetuskromatograafia

Kokkuvõtlikult võib öelda, et afiinsus ja ioonvahetuskromatograafia on vedelikkromatograafiliste meetodite kaks vormi. Peamine erinevus afiinsuse ja ioonivahetuskromatograafia vahel on see, et afiinsuskromatograafiat saab kasutada segu laetud või laadimata komponentide eraldamiseks, samas kui ioonivahetuskromatograafiat saab kasutada segu laetud komponentide eraldamiseks.

Viide:

1. “Afiinsuskromatograafia”. Vikipeedia, Wikimedia Foundation, 5. oktoober 2018. Saadaval siin 
2. Libretekstid. "Ioonivahetuskromatograafia." Keemia LibreTexts, Libretexts, 29. detsember 2016. Saadaval siin  

Pilt viisakalt:

1. “Nikkelvaik” - autor Pdcook - Oma töö, (CC BY-SA 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu 
2. “Iex” autor Daliak (üldkasutatav) Commonsi Wikimedia kaudu