Erinevus Bradfordi ja Lowry valgu testi vahel

võtme erinevus bradfordi ja lowry valgu testi vahel on see Bradfordi valgu test põhineb värvaine Coomassie briljantsinise G-250 neeldumisiirdel, Lowry valgu test põhineb vaskioonioonide (Cu +) ioonide reageerimisel, mis saadakse peptiidsidemete oksüdeerimisel Folin-Ciocalteu reagendiga..

Test on analüüsimeetod, mis aitab iseloomustada proovi peamisi funktsionaalseid komponente. Seega võib test olla kas kvalitatiivne või kvantitatiivne test. Seda tüüpi analüüse kasutavad rutiinselt paljud valdkonnad, sealhulgas labori meditsiin, farmakoloogia, keskkonnabioloogia, molekulaarbioloogia, biokeemia ja immunoloogia. Bradfordi ja Lowry valgu test on kaks biokeemilist testi, mis määravad valgu kontsentratsiooni proovilahuses. Mõlemas testis kasutatakse tulemuste saamiseks kolorimeetrilisi tehnikaid.

SISU

1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on Bradfordi valgu test
3. Mis on Lowry valgu test
4. Bradfordi ja Lowry valguanalüüsi sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - Bradford vs Lowry valgu test tabelina
6. Kokkuvõte

Mis on Bradfordi valgu analüüs?

Bradfordi valgu test on kiire spektroskoopiline analüütiline protseduur valkude analüüsiks. See näitab lahuse valgu kontsentratsiooni mõõtmisel suurt täpsust. Marion Bradford tutvustas seda protseduuri 1976. aastal. Selles testis põhineb kogu reaktsioon mõõdetud valkude aminohapete koostisel. Teisisõnu on Bradfordi valgu test kolorimeetriline test. See kasutab värvi Coomassie briljantsinist. Seega sõltub see kolorimeetriline valgu test värvaine neelduvuse nihest. Coomassie briljantsinine G-250 on kolmes vormis: katioonne (punane), anioonne (sinine) ja neutraalne (roheline). Happelistes tingimustes muutub värvaine punane vorm siniseks. See kinnitab valgu seondumist. Kui valku pole, võib lahus jääda pruuniks.

Joonis 01: Bradfordi valgu test

Bradfordi valguanalüüs erineb teistest valgutestidest, kuna see on vähem tundlik valgulahuses esinevate erinevate keemiliste ühendite häirete suhtes. Nende ühendite hulka kuuluvad naatrium, kaalium, glükoos ja sahharoos jne.

Mis on Lowry valgu test?

Lowry valgu test on biokeemiline test, mida kasutatakse valgu üldtaseme määramiseks lahuses. Oliver H. Lowry on inimene, kes töötas selle reaktiivi välja 1940. Protseduur kujutab lahuse valgu kogukontsentratsiooni värvimuutuse kaudu, mis on võrdeline valgu kontsentratsiooniga lahuses. Seega on see ka kolorimeetriline valgu test.

Selle protseduuri aluseks on peptiidsidemete ja Folin-Ciocalteu reagendi oksüdeerimisel tekkinud vaseioonide (Cu +) vaheline reaktsioon. See reagent sisaldab ka fosfomolübdeenhapet ja fosfor-volframhapet. Lowry valguanalüüsi reaktsioonimehhanism pole aga hästi arusaadav. Kuid see hõlmab tsüsteiini, trüptofaani ja türosiini jääkide oksüdeerimist Folin-Ciocalteu reagendi redutseerimise teel.

Joonis 02: Lowry valgu test

Tsüsteiinijäägid aitavad kaasa Lowry valgu testis täheldatud neeldumisele ja reaktsiooni tulemuseks on briljantsinine molekul; heteropolü molübdeeni sinine. Selle molekuli redutseerimist mõõdetakse neeldumisega lainepikkusel 660 nm. Seega tuletab foliin-Ciocalteu reagenti redutseerinud tsüsteiini ja trüptofaani jääkide kontsentratsioon valgu kogukontsentratsiooni lahuses.

Millised on Bradfordi ja Lowry valguanalüüsi sarnasused?

• Bradfordi ja Lowry valguanalüüsid määravad valgu kontsentratsiooni lahuses.
• Mõlemad meetodid on kolorimeetrilised.
• Samuti on mõlema meetodi tundlikkus kõrge.

Mis vahe on Bradfordi ja Lowry valguanalüüsi vahel?

Bradfordi ja Lowry valgu test on kahte tüüpi analüüsid, mis määravad valgu kontsentratsiooni lahuses. Bradfordi valguanalüüs tugineb värvaine Coomassie briljantsinise G-250 neeldumise nihkele, samal ajal kui Lowry valguanalüüs sõltub peptiidsidemete oksüdeerumisel tekkivate vaseioonide reageerimisest Folin-Ciocalteu reagendiga. Niisiis, see on peamine erinevus Bradfordi ja Lowry valgutesti vahel. Bradfordi valgu test võtab tulemuse saamiseks 15 minutit, Lowery valgu test tulemuse saamiseks 40-60 minutit. Seega on see teine ​​erinevus Bradfordi ja Lowry valgutesti vahel. Lisaks sõltub Bradfordi valgu test aminohappe koostisest, Lowry valgu test osaliselt aminohappe koostisest. Seega on see erinevus ka Bradfordi ja Lowry valgutesti vahel.

Allpool inforaafiline teave sisaldab rohkem üksikasju Bradfordi ja Lowry valgu testi erinevuse kohta.

Kokkuvõte - Bradford vs Lowry valgu test

Test on analüüsimeetod, mida kasutatakse proovi peamise funktsionaalse komponendi iseloomustamiseks. Bradfordi ja Lowry valguanalüüs on kahte tüüpi valguanalüüsid, mis toimivad kolorimeetriliste meetodite kohaselt. Nii Bradfordi kui ka Lowry valgu analüüs määravad valgu kontsentratsiooni lahuses. Põhiline erinevus Bradfordi ja Lowry valguanalüüsi vahel peitub siiski nende kasutatavas kolorimeetrilises tehnikas. Bradfordi valguanalüüsis kasutati Coomassie briljantsinist G-250, Lowry valguanalüüsis aga vaseioonide (Cu +) ioone ja Folin-Ciocalteu reagenti. Lisaks annab Bradfordi meetod kiireid tulemusi kui Lowry valgu test. Mõlemad meetodid on aga väga tundlikud meetodid ja neid võivad mõjutada erinevad ained.

Viide:

1. “Kanada botaanika ajakiri”. Kanada ajakiri botaanikast - 60 (7): 1046 - PDF, saadaval siin.
2. “Valguanalüüside keemia.” Thermo Fisher Scientific - USA, saadaval siit.

Pilt viisakalt:

1. “Bradfordi valguanalüüs” - autor Helito - Enda töö (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia kaudu