Kolooniaid moodustav üksus (CFU) ja kõige tõenäolisem arv (MPN) on kaks meetodit, mida kasutatakse mikroorganismide loendamiseks proovides. Mõlemat parameetrit kasutatakse veeproovides vee kvaliteedi ja fekaalse indikaatori bakterite tuvastamiseks. Kolooniaid moodustav üksus on mõõt, mida kasutatakse elujõuliste bakterirakkude või seenerakkude arvu loendamiseks konkreetse proovi mahus või kaalus. Selle parameetri standardühik on CFU / ml või CFU / g. Kõige tõenäolisem arv on teine ühik, mida kasutatakse vedelas proovis elujõuliste bakterirakkude arvu mõõtmiseks. Peamine erinevus CFU ja MPN vahel on see CFU arvutatakse tahkel agariplaadil kasvavate bakteri- ja seenekolooniate põhjal samas MPN arvutatakse vedelas keskkonnas kasvavate elujõuliste bakterite põhjal.
1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on CFU?
3. Mis on MPN
4. Kõrvuti võrdlus - CFU vs MPN tabelina
5. Kokkuvõte
Kolooniaid moodustav üksus (CFU) on parameeter, mis mõõdab elujõuliste bakteri- või seenerakkude arvu antud proovis. Meetodit, mis loendab kolooniaid moodustavaid ühikuid, nimetatakse kui tavaline plaatide arv. Agariplaatidel olevad elujõulised kolooniad väljendatakse CFU-dena vedelike proovi 1 ml (kolooniaid moodustav ühik milliliitri kohta) või CFU-dena tahkete ainete proovi 1 g (kolooniaid moodustav ühik grammi kohta) kohta.
CFU mõõtmiseks proovis kasutatakse kahte levinumat meetodit. Nemad on laotusplaadi meetod ja valada plaadi meetod. Neid kahte meetodit toetab meetod, mida nimetatakse järjestikuseks lahjendamiseks. Järjestikku lahjendatud proovid võimaldavad agari pinnal saada loendatava arvu kolooniaid. Teadaoleva koguse proovi võib laotada agarplaadi pinnale või segada agariga ja valada plaadile. Seejärel inkubeeritakse plaati ja loendatakse tekkinud kolooniad. Kolooniate arv on seotud mikroorganismide arvuga algses proovis. Plaate, kus on liiga palju või liiga vähe kolooniaid, ei arvestata, kuna tulemused ei pruugi nende plaatide osas olla statistiliselt täpsed. Statistiliselt on parim vahemik 30–300 kolooniat agarplaadil. Seega tuleks täpseks loendamiseks valida õiged plaadid. Ülaltoodud funktsiooni jaoks viiakse läbi jada lahjendus.
Kui olete elujõuliste kolooniate arvu loendanud plaatidel, saab CFU / ml arvutada järgmise võrrandi abil.
CFU originaalse proovi ml kohta = kolooniate arv plaadi X lahjendusteguril
Lahjendustegur = (1 / plaadi lahjendus)
Näiteks kui saate 10-le plaadile 149 kolooniat-4 lahjenduse korral saab bakterite arvu 1 ml algses proovis arvutada järgmiselt:
CFU / ml = (149) x (1/10-4)
= 149 × 104 või 1490000
= 1. 49 x 106
Joonis 01: kolooniat moodustav üksus
kõige tõenäolisem arv on CFU / ml alternatiivne meede. MPN hindab ka vedelas proovis olevaid elujõulisi rakke. See loendab vedelas kultuuris kasvavaid organisme ja on peamiselt bakterioloogiline tehnika. See meetod on eriti kasulik proovide jaoks, mis sisaldavad bakterirakke madalas kontsentratsioonis; näiteks piim, joogivesi jne. MPN väärtus väljendatakse 100 ml mahu kohta. MPN tugineb tõenäosusteoorial põhinevale statistilisele meetodile. On olemas statistilised tabelid, mille eesmärk on leida MPN väärtused 100 ml proovi kohta. Need tabelid näitavad tulemusi 95% usalduspiiridega.
MPN väärtus arvutatakse pärast meetodit, mida nimetatakse mitmekordse toru fermentatsioonimeetodiks. Kolm katseklaasi, mis sisaldavad sobivat söödet, nakatatakse kolme erineva koguse prooviga, näiteks 10 ml, 1 ml ja 0,1 ml, ning inkubeeritakse kasvu jaoks. Pärast inkubatsiooniperioodi hinnatakse katseklaasid + (positiivne) või - (negatiivne) kasvu olemasolu või puudumise suhtes. Seejärel võrreldakse positiivsete ja negatiivsete tulemuste mustrit statistiliste tõenäosuste MPN-tabeliga, et hinnata mikroorganismide arvu. Seejärel antakse 100 ml proovi jaoks MPN väärtus. MPN-i kasutatakse laialdaselt veeproovides esinevate kolibakterite tuvastamiseks.
Joonis 02: MPN-tabel
CFU vs MPN | |
CFU on mõõt, mida kasutatakse elujõuliste bakteri- või seenekolooniate arvu väljendamiseks antud proovis. | MPN on CFU alternatiivne meede ja mõõdab elujõuliste bakterirakkude arvu vedelas proovis. |
Ühik | |
CFU / ml või CFU / g | MPN / 100 ml |
Arvutus | |
CFU arvutamiseks loetakse agariplaatidel kasvatatud kolooniate arv. | MPN arvutamiseks võrreldakse torude positiivseid ja negatiivseid mustreid MPN-i statistilise tabeliga. |
Sarja lahjendamise tehnika | |
Enne proovide asetamist agariplaatidele tehakse seeriaviisiline lahjendus. | MPN arvutamisel jadalahjendust tavaliselt ei tehta |
Meetodid | |
Laotusplaadi meetod ja valamisplaadi meetod on CFU saamiseks kahte tüüpi meetodid. | MPN-väärtuse saamiseks kasutatakse mitut toru fermenteerimist. |
Mikroobide kasvu mõõtmine on vajalik mitmel põhjusel. Toidutöötlemisettevõtetes on vaja mõõta toidus leiduvate mikroorganismide taset ja tüüpi. Toiduainetööstuses ja meditsiinis on vaja tagada steriliseerimisprotseduuride tõhus rakendamine. Reoveepuhastusjaamades tuleb rutiinselt võtta mikroobide arvu. Protseduuri optimeerimisel molekulaarbioloogias tuleb mõõta kolooniate arvu plaatidel. Seetõttu on saadaval erinevad loendamise ja kasvu mõõtmise meetodid. CFU ja MPN on kaks sellist meetodit, mis on laialt levinud erinevates valdkondades. CFU on antud proovis leiduvate elujõuliste bakteri- ja seenekolooniate arv. Selle arvutamiseks kasutatakse standardset plaatide loenduse meetodit või elujõulist plaatide loenduse meetodit. MPN on veel üks mõõt, mis väljendab bakterirakkude arvu vedelas proovis antud mahus. Selle arvutamiseks kasutatakse mitmekordse käärimise meetodit ja MPN-tabelit. See on erinevus CFU ja MPN vahel.
Selle artikli PDF-versiooni saate alla laadida ja seda võrguühenduseta otstarbel kasutada tsitaatide märkuste kohaselt. Laadige alla siit PDF-versioon. Erinevus CFU ja MPN vahel.
“Kolooniaid moodustav üksus.” Vikipeedia. Wikimedia Foundation, 28. mai 2017. Veeb. Saadaval siin. 01. juuni 2017.
“Mikrobioloogia - 014 - kõige tõenäolisem arv.” Mikrobioloogia - 014 - kõige tõenäolisem arv | Mikrobioloogia bakalaureuse programm. N.p., n.d. Võrk. Saadaval siin. 01. juuni 2017.
1. ” Käsitsi CFU arvestamine ”autor: Quentin Geissmann - Oma töö (CC BY-SA 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu
2. “OSC Microbio 00 EE MPNTable” CNX OpenStaxi poolt - (CC BY 4.0) Commonsi Wikimedia kaudu