Loomarakkude kultiveerimine toimub loomade rakuliinide säilitamiseks, et läbi viia paljusid teadusuuringuid. Loomade rakuliini hoitakse steriilsetes tingimustes ja nad vajavad spetsiaalset tehnikat. Neid kasutatakse vaktsiinide tootmist käsitlevates uuringutes, raku käitumise kindlakstegemiseks kantserogeenide ja mutageenide suhtes ning vähiuuringutes. Rakukultuuri söötmed on loomade rakukultuuri õnnestumiseks väga olulised. Rakukultuurisöötmeid on erinevat tüüpi, näiteks Dulbecco modifitseeritud kotka sööde (DMEM) ja Kotka minimaalne hädavajalik keskkond (EMEM). DMEM on modifitseeritud põhisööde, mille aminohapete ja vitamiinide kontsentratsioon on suurenenud kuni neljakordseks. See hõlmab ka veel mõnda asendust, mis suurendab söötme toitaineolusid. EMEM on üks esimesi loomsete rakukultuuride söötmete tüüpe, mille on välja töötanud Harry Eagle. See on lihtne basaalkeskkond, kus toitainete koostis on minimaalne. võtme erinevus kahe söötme vahel on toitainete koostis. EMEM koosneb minimaalsetest toitainete kontsentratsioonidest, mis on vajalikud kultuuri kasvuks, samal ajal kui DMEM on palju keerukamaid söötmeid, mille aminohapete ja vitamiinide kontsentratsioon on suurenenud.
1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on DMEM
3. Mis on EMEM?
4. DMEMi ja EMEMi sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - DMEM vs EMEM tabelina
6. Kokkuvõte
Dulbecco modifitseeritud kotka sööde (DMEM) on modifitseeritud söötmetüüp, mis on kaubanduslikult valmistatud kreemja valge pulbrina. Seda kohandatakse EMEM-ist ja toitainete koostist muudetakse aminohapete ja vitamiinide kontsentratsiooni suurendamise teel. Aminohapete kontsentratsioon on põhisöötmega võrreldes kahekordne. Vitamiinide kontsentratsiooni suurendatakse neljakordseks, suurendades söötme toitainete sisaldust.
DMEM-i modifitseeritakse ka, lisades rohkem sooli nagu raud (III) nitraat, naatriumpüruvaat ja mõned asendamatud aminohapped nagu seriin ja glütsiin. Samuti on söötmes muutunud glükoosi kontsentratsioon. Algne koostis koosneb 1000 mg / l glükoosist, samas kui DMEM-is suurendatakse kontsentratsiooni 4500 mg / l. DMEM nõuab ka seerumi söötme täiendamist, kuna see ei ole täielik sööde. Kõige sagedamini täiendatakse DMEM veise loote seerumiga (FBS). FBS pakub kultiveerimisprotsessi jaoks vajalikke valke ja kasvufaktoreid.
Söötme pH varieerub sõltuvalt naatriumvesinikkarbonaadi lisamisest. Söötme pH on enne naatriumvesinikkarbonaadi lisamist umbes 6,80 - 7,40, samal ajal kui pH on pärast naatriumvesinikkarbonaadi lisamist vahemikus 7,60 - 8,20. Kandja säilitustemperatuur on 2–8 0C.
Joonis 01: DMEM
Eagle'i minimaalne oluline sööde (EMEM) on üks esimesi väljatöötatud söötmeid loomade rakuliinide kasvatamisel. EMEM-i abil kasvatatud loomsete rakuliinide esimesed tüübid hõlmavad hiire L-rakke ja HeLa-rakke. EMEM-meediumid on ka teatud tüüpi modifitseeritud meediumid. Harry Eagle sõnastas kõigepealt EMEMi meediumi. EMEM sööde sisaldas asendamatuid aminohappeid ja vitamiine rakutüüpide jaoks vajalikus minimaalses kontsentratsioonis. Asendamatuid aminohappeid ei lisatud koostisse ning glükoosi ja naatriumvesinikkarbonaadi kontsentratsioonid on vähenenud. Kuigi sööde sisaldas rakkude edukaks kasvamiseks tasakaalustatud koguses minimaalseid kasvunõudeid.
EMEM ei ole täielik meedium. Seetõttu on imetajarakkude edukaks kasvuks vajalik täiendamine seerumiga. EMEM-i kasutatakse väga erinevates rakkudes ja see on rakukultuuri uurijate seas endiselt populaarne meedium.
DMEM vs EMEM | |
DMEM on modifitseeritud tüüpi põhikeskkond, suurenenud aminohapete ja vitamiinide kontsentratsiooniga. See hõlmab ka veel mõnda asendamist, mis parandab söötme toitaineolusid. | EMEM on üks esimesi loomsete rakukultuuride söötmete tüüpe, mille on välja töötanud Harry Eagle. See on lihtne basaalkeskkond, kus toitainete koostis on minimaalne. |
Aminohappe modifikatsioonid | |
Aminohappe kontsentratsioon on DMEM söötmes kasvanud kahekordseks. | EMEM-is kasutatakse aminohappe minimaalset kontsentratsiooni. |
Vitamiinide modifikatsioonid | |
Vitamiinide kontsentratsioon on DMEM-is tõusnud neljakordseks. | EMEM-is kasutatakse vitamiinide minimaalset kontsentratsiooni. |
Glükoosi kontsentratsioon | |
Glükoosi kontsentratsioon DMEM-is on tõusnud 4500 mg / l. | Glükoosi kontsentratsioon on EMEM-is 1000 mg / L. |
Asendamatute aminohapete olemasolu | |
Esineb DMEM-is. | EMEM-is puudub. |
Lisakomponentide olemasolu | |
DMEM-is on sellised komponendid nagu raudnitraat, naatriumpüruvaat. | EMEM sisaldab minimaalselt toitaineid. |
DMEM ja EMEM on kaks populaarset loomarakkude kultuurisöödet, mis erinevad peamiselt toitainete koostise poolest. DMEM on EMEMi modifitseeritud vorm, kus koos mõnede uute komponentide lisamisega suurendatakse toitainete kontsentratsiooni. EMEM on minimaalne sööde ja sisaldab kõiki olulisi tegureid, mis on vajalikud loomade rakuliinide edukaks kasvuks. Neid söötmeid tuleks kasutada steriilsetes tingimustes ja enne kasutamist tuleb mõlemat söödet seerumiga täiendada. See erinevus on DMEM ja EMEM vahel.
Selle artikli PDF-versiooni saate alla laadida ja seda võrguühenduseta otstarbel kasutada tsitaatide märkuse kohaselt. Laadige alla PDF-versioon siit. Erinevus DMEMi ja EMEMi vahel
1.Arora, Meenakshi. “Rakukultuurisööde: ülevaade”. Materjalid ja meetodid, 25. november 2017. Saadaval siin
2. “Kotka minimaalne oluline keskkond.” Wikipedia, Wikimedia Foundation, 24. detsember 2017. Saadaval siin
1.'Lifetech-DMEM'By Phaeton68 - Oma töö, (CC BY-SA 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu