Geeni amplifikatsiooni ja geenide kloonimise erinevus

võtme erinevus geeni amplifikatsiooni ja geenide kloonimise vahel on see, et geeni amplifikatsioon on huvipakkuvast geenist paljude koopiate tegemise protsess in vitro polümeraasi ahelreaktsiooni teel. Kuid geenide kloonimine on huvipakkuvast geenist paljude koopiate tegemise protsess in vivo valmistades rekombinantse plasmiidi ja muutes selle peremeesbakteriks.

Geen on DNA spetsiifiline fragment, mis kodeerib valku. Organism valdab tuhandeid geene. Lisaks on molekulaarbioloogiliste meetodite abil võimalik korrutada oluliste geenide DNA järjestusi. Geenide amplifitseerimine ja geenide kloonimine on kaks sellist protseduuri. Mõlemad protseduurid toodavad huvipakkuva geeni palju koopiaid. Nende metoodika osas on geenide amplifikatsiooni ja geenide kloonimise vahel siiski erinevus.

SISU

1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on geeni võimendus
3. Mis on geenikloneerimine
4. Geeni amplifikatsiooni ja geeni kloonimise sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - geeni amplifikatsioon vs geeni kloonimine tabelina
6. Kokkuvõte

Mis on geeni võimendus?

Geeni võimendamine on konkreetse geeni koopiate tegemise protsess, kasutades polümeraasi ahelreaktsiooni. Geeni amplifitseerimiseks tuleks selle konkreetse organismi DNA ekstraheerida, kasutades korralikku DNA ekstraheerimise protokolli. Seejärel tuleks ekstraheeritud kaheahelaline DNA denatureerida, et saada eraldatud üksikahelad. Järgmine samm hõlmab huvipakkuva geeni koopiate tegemiseks PCR reaktsiooni kasutamist. Lisaks sisaldab PCR segu vajalikke praimereid, nukleotiide, DNA polümeraasi ensüümi, matriitsi DNA-d ja muid koostisosi. HRV programmi lõpus toimub huvipakkuva geeni amplifikatsioon.

Joonis 01: geeni võimendus

Lisaks on geenivõimendus esimene samm konkreetse järjestuse tuvastamisel, organismi tuvastamisel, haiguste diagnoosimisel ja geenikogude moodustamisel jne..

Mis on geenikloneerimine?

Geenide kloonimine on meetod geenitehnoloogias geenikogude tegemiseks või huvipakkuvast geenist paljude koopiate tegemiseks. See protsess hõlmab rekombinantse plasmiidi valmistamist ja rekombinantse plasmiidi transformeerimist peremeesrakku, eriti bakterirakku. Kloon on algse organismi või molekuli identne koopia. Geenide kloonimine võib teha tuhandeid geenikloone.

Joonis 02: geeni kloonimine

Kui huvipakkuv geen on kindlaks tehtud, saab selle konkreetse organismi genoomist eraldada, piirates seda spetsiifiliste restriktsiooniensüümidega. Seejärel, kasutades sama restriktsiooniensüümi, tuleks geenifragmendi sisestamiseks avada plasmiidid (vektorid). Seejärel muundatakse rekombinantne plasmiid peremeesbakteriks, kasutades erinevaid meetodeid, näiteks elektroporatsiooni. Mõned rekombinantsed plasmiidid sisenevad peremeesraku rakkudesse. Antibiootikumi abil saab transformeeritud baktereid valida, isoleerida ja kasvatada värsketes söötmetes. Seega aitab see tehnika hankida miljoneid geenikloone.

Millised on sarnasused geeni võimenduse ja geeni kloonimise vahel?

• Geeni amplifikatsioon ja geenide kloonimine on kaks molekulaarbioloogilist tehnikat.
• Mõlema meetodi korral korrutatakse konkreetne DNA järjestus või geen miljonites või tuhandetes kordades.
• Pealegi on mõlemad tehnikad väga olulised paljude teadusvaldkondade jaoks.

Mis vahe on geenide võimendumisel ja geenide kloonimisel?

Geeni võimendus on protsess, mille käigus konkreetse geeni koopiad tehakse kasutades in vitro meetod, mida nimetatakse PCR. Teisest küljest on geenide kloonimine protsess, mille käigus konkreetse geeni koopiad tehakse kasutades in vivo Selle meetodi abil rekombinantsed vektorid konstrueeritakse ja korrutatakse elusorganismis. Niisiis, see on peamine erinevus geeni amplifikatsiooni ja geenide kloonimise vahel. Lisaks võtab geeni amplifikatsioon vaid paar tundi, samas kui geeni kloonimine võtab mitu päeva. Seetõttu võime pidada seda ka erinevuseks geeni amplifikatsiooni ja geeni kloonimise vahel. Lisaks näitab geeni amplifikatsiooniprotsess vähem vigu, samas kui geenide kloonimisprotsess näitab rohkem vigu.

Järgnevas infograafias võetakse kokku erinevus geeni amplifikatsiooni ja geeni kloonimise vahel.

Kokkuvõte - geeni võimendus vs geeni kloonimine

Geeni amplifitseerimine on soovitud geeni koopiate tegemise protsess, kasutades in vitro tingimustes polümeraasi ahelreaktsiooni, samas kui geeni kloonimine on huvipakkuva geeni koopiate tegemise protsess, kasutades rekombinantset DNA molekuli ja elusorganismi / peremeesbakterit. Seega on see peamine erinevus geeni amplifikatsiooni ja geeni kloonimise vahel.

Viide:

1. “Molekulaarne kloonimine”. Vikipeedia, Wikimedia Foundation, 2. august 2019, saadaval siin.
2. “Geeni võimendus”. Geeni võimendus - ülevaade | ScienceDirexi teemad, saadaval siin.

Pilt viisakalt:

1. Madprime'i “PCR” - oma töö (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedia kaudu
2. “Molekulaarse kloonimise sammud”, autor Alexpicardal97 - Oma töö (CC BY-SA 4.0) Commonsi Wikimedia kaudu