Mikroskoopia kontekstis peetakse värvimist oluliseks sammuks mikroskoopilise pildi kontrastsuse suurendamisel, eriti bioloogiliste kudede erinevate struktuuride esiletoomiseks. Perifeerse vere ja luuüdi määrimise ajal kasutatakse Wrighti ja Giemsa plekke. Neid plekke tuntakse kui Romanowsky plekke. Mõlemad plekid koosnevad olulistest komponentidest: oksüdeeritud metüleensinine, eosiin Y ja sinise värvi B värvained. Metüleensinise ja taevasinise B ülesandeks on tuuma värvimine sinise kuni lilla värvusega. Neid plekke kasutatakse laialdaselt erütrotsüütide morfoloogia uurimisel ja erütrotsüütide arvu määramisel. Romanowsky värvimisprotseduuride abil saab diagnoosida erinevaid haigusseisundeid, näiteks leukeemiat. Erosiini ja metüleensinise värvainete segust koosnevate vererakkude eristamiseks kasutatakse Wright-värvimist. Giemsa värvimist kasutatakse nii bakterirakkude kui ka inimese rakkude värvimisel ning seda saab kombineerida Wrighti peitsiga, et tekiks Giemsa Wright plekk.. See on peamine erinevus Giemsa ja Wrighti peitsi vahel.
Giemsa peitsi kasutatakse tsütogeneetikas ja malaaria ning teiste parasiitide haiguste parasiitide histopatoloogilises diagnoosimisel. Giemsa plekki võib pidada ka põhiliseks plekiks lümfoomide klassifitseerimisel Kieli klassifikatsioonis. Giemsa plekki on vaja Giemsa ribade jaoks, mida üldiselt tuntakse G-ribadena. Giemsa triibutamist kasutatakse kromosoomide värvimiseks ja kasutatakse ka karyogrammide loomisel. Kromosomaalsed kõrvalekalded, nagu translokatsioonid ja ümberkorraldused, tuvastatakse Giemsa ribade abil. Giemsa peitsi kasutatakse histoloogias tänu tuumamembraani ja kromatiini kõrgekvaliteedilisele värvimisele, mõne rakulise komponendi metakromaasiale ja tsütoplasmaatilise värvimise erinevatele omadustele rakutüübi põhjal.
Joonis 01: Giemsa plekk
Giemsa lahus sisaldab metüleensinist, Azure B-d ja eosiini ning plekk valmistatakse kaubanduslikult, kasutades Giemsa pulbrit. Peitsi püsivus sõltub metüleenist taevasinest ja selle segust koos metüleensinisega, mis moodustab eosinaadi. Giemsa plekk on eriti oluline DNA ahela fosfaatrühmade jaoks ja see kinnitub piirkondadesse, kus on palju adeniini-tümiini sidemeid. Giemsa värvimismeetodi korral asetatakse õhuke kiht proovi algselt mikroskoopilisele slaidile koos mõne tilga puhta metanooliga umbes 30 sekundiks. Seejärel sukeldatakse objektiklaas umbes 20-30 minutiks värskelt valmistatud 5-protsendilisse Giemsa peitsilahusesse. Lõpuks pesta klaasi kraaniveega ja lasta kuivada. Giemsa plekk on tuntud kui diferentsiaalplekk, kuna Wrighti-Giemsa plekk moodustub siis, kui Wrighti plekk kombineeritakse Giemsaga. Seetõttu saab seda kasutada inimese rakkudele kinnitatud patogeensete bakterite uurimisel. Inimese rakud ja bakterirakud värvitakse dentsentsiaalselt ning täheldatakse vastavalt lilla ja roosa värvi.
Wrighti plekk on nimetatud James Homer Wrighti järgi, kes modifitseeris Romanowsky peitsi. Wrighti pleki kasutatakse vererakutüüpide eristamiseks, kuna see aitab eristada vererakutüüpe. Selle tulemusel saab nakkusi diagnoosida, jälgides valgeliblede arvu. Peits on eosiini, mis on punase värvusega, ja metüleensinise värvainete segu. Wrighti plekki kasutatakse uriiniproovide, perifeerse vere määrdumise ja luuüdi aspiraatide värvimiseks ja jälgimiseks valgusmikroskoopide abil. Wrighti plekki kasutatakse krütoomide värvimisel tsütogeneetikas, et soodustada mitmete haiguste ja sündroomide diagnoosimist. Wrighti plekiga värvitud uriiniproovid tuvastavad eosinofiilid, mis viitavad urotrakti infektsioonile.
Joonis 02: Wrighti plekk
Wrighti värvimisprotsessis valmistatakse õhu käes kuivatatud verekile, Wrighti plekk kantakse peale ja jäetakse 3 minutiks seisma. Seejärel lisatakse võrdse koguse pleki puhver, segatakse ettevaatlikult ja jäetakse 5 minutiks seisma. Objektiklaasi hoitakse horisontaalselt ja pestakse hästi neutraalse destilleeritud veega. Lõpuks kuivatatakse ja vaadeldakse mikroskoobi all.
Giemsa plekk vs Wright plekk | |
Giemsa värvimine on diferentsiaalse värvimise tehnika, mida kasutatakse peamiselt bakterirakkude ja ka inimese rakkude värvimiseks. | Wright-plekk on diferentsiaalvärvimismeetod, mida kasutatakse peamiselt verevalude, uriiniproovide ja luuüdi aspiraatide värvimisprotseduurides. |
Värvimine on mikroskoopia ajal kasutatav oluline laboratoorne tehnika, mida kasutatakse mikroskoopilise pildi kontrastsuse suurendamiseks. Giemsa plekk ja Wright plekk, mida nimetatakse Romanowsky plekkideks, hõlmavad valgete vereliblede erinevat arvu ja punaste vereliblede raku morfoloogia uurimist. Oksüdeeritud metüleensinine, eosiin Y ja azure B värvid on Romanowsky plekide olulised komponendid. Giemsa peitsi kasutatakse peamiselt bakterirakkude värvimisel, kuid seda saab kasutada ka inimrakkude jaoks. Wright-värvimist kasutatakse laialdaselt veretäidete, uriiniproovide ja luuüdi aspiraatide värvimisel. See on erinevus Giesma ja Wrighti pleki vahel.
Selle artikli PDF-versiooni saate alla laadida ja seda võrguühenduseta otstarbel kasutada tsitaatide märkuse kohaselt. Laadige siit alla PDF-versioon. Erinevus Giemsa ja Wrighti plekkide vahel
1. Barcia, J J. “Giemsa plekk: selle ajalugu ja rakendused.” Rahvusvaheline kirurgilise patoloogia ajakiri, USA Riiklik Meditsiiniraamatukogu, juuli 2007, saadaval siin. Juurdepääs 12. septembril 2017
2. Krafts, K P ja S E Pambuccian. "Romanowsky värvimine tsütopatoloogias: ajalugu, eelised ja piirangud." Biotehnoloogia ja histokeemia: Bioloogiliste plekkide komisjoni ametlik väljaanne, USA Riiklik Meditsiiniraamatukogu, aprill 2011, saadaval siin. Juurdepääs 12. septembril 2017
1. “Trüpanosoomi-evansi-roti-vere-Giemsa-peitsi” autor: Alan R Walker - Oma töö (CC BY-SA 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu
2. “Mastrakk, luuüdi aspiraat, Wright plekk (5916735712)” autor Ed Uthman, Houston, TX, USA - Mast Cell, luuüdi aspiraat, Wright StainUploaded by CFCF (CC BY 2.0) via Commons Wikimedia