Erinevus situatsiooni hübridisatsiooni ja immunohistokeemia vahel

Peamine erinevus - olukorras hübridiseerumine vs immunohistokeemia
 

Vähktõve ja nakkushaiguste diagnostika on populaarne suundumus, kus kasvajate või nakkusrakkude, nende paljunemise ja raku arengukohtade tuvastamiseks ning enamiku nakkuslike ja mittenakkuslike haiguste geneetilise baasi analüüsimiseks kasutatakse uudseid proteoomika- ja genoomipõhiseid tehnikaid. Selle tulemuseks on täpne ravimite töötlemine ja kujundamine ning haiguste jaoks kohandatud raviviiside väljatöötamine. In situ hübridisatsioon (ISH) ja immunohistokeemia (IHC) on kaks sellist vähibioloogias laialdaselt kasutatavat tehnikat ning põhiline erinevus in situ hübridisatsiooni ja immunokeemia vahel on molekulides, mida kasutatakse analüüsiprotseduuris. ISH-s kasutatakse nukleiinhappe sondid analüüsimisel, samas kui IHC-s kasutatakse diagnostiliseks määramiseks monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi.

SISU

1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on in situ hübridisatsioon
3. Mis on immunohistokeemia
4. In situ hübridisatsiooni ja immunohistokeemia sarnasused
5. Võrdlus kõrvuti - hübridiseerumine olukorras vs immunohistokeemia tabelina
6. Kokkuvõte

Mis on in situ hübridisatsioon (ISH)?

In situ hübridiseerimine on nukleiinhapete hübridiseerimise tehnika, mis viiakse otse läbi kudede osal või osal, terves koes või rakkudes. Meetod sõltub Watson Cricki komplementaarse aluse sidumise teooriast, mille tulemuseks on kas DNA-DNA hübriidid või DNA-RNA hübriidid, mis võimaldavad tuvastada muteerunud geene või tuvastada vajaliku huvipakkuva geeni. Hübridisatsioonitehnikas kasutatakse sondidena üheahelalisi DNA järjestusi, kaheahelalisi DNA järjestusi, üheahelalisi RNA järjestusi või sünteetilisi oligonukleotiidjärjestusi ning need sondid on radioradiograafiaga identifitseerimise jaoks 5'-otsas radioaktiivse fosforiga märgistatud või märgistatud fluorestsentsvärvide abil . Saadaval on erinevat tüüpi ISH-tehnikaid, mis põhinevad kasutatud sondi tüübil ja järgitud visualiseerimistehnika tüübil.

Joonis 01: fluorestsents olukorras hübridiseerimisel

ISH-i on palju rakendusi, peamiselt nakkushaiguste molekulaardiagnostikas, et tuvastada patogeenide olemasolu ja kinnitada patogeeni molekulaardiagnostika abil. Seda kasutatakse ka arengubioloogia, karüotüpiseerimise ja fülogeneetilise analüüsi ning kromosoomide füüsilise kaardistamise valdkonnas.

Mis on immunohistokeemia (IHC)?

IHC tehnikas on analüüsitud peamine molekul antigeen. IHC ajal kasutatakse monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi antigeenide olemasolu kindlakstegemiseks nakatumise või pahaloomuliste rakkude proliferatsiooni staatuse korral. See meetod põhineb antigeeni ja antikeha sidumisel ning selle tehnika jaoks kasutatakse ensüümimärgiseid; üks selline rakendus on ELISA (ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs). Markeriteks võivad olla ka fluorestsentsmärgistatud antikehad või radiomärgistatud antikehad.

Joonis 02: Immunohistokeemia

IHC-d kasutatakse laialdaselt vähirakkude tuvastamisel. Diagnostilised protseduurid on suunatud kasvajarakkudes esinevatele antigeenidele, et tuvastada ja iseloomustada kasvajat. Sama protseduur on sisse viidud ka nakkusetekitajate diagnoosimiseks. Monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi kasutatakse ka erinevate geeniproduktide analüüsimiseks, võimaldades soovitud valgu ja manustatud sünteetilise antikeha vahel antikeha-antigeeni sidumisreaktsiooni..

Millised on sarnasused in situ hübridisatsiooni ja immunohistokeemia vahel?

• ISH ja IHC on väga spetsiifilised reaktsioonid.
• Mõlemad tehnikad on väga täpsed.
• Mõlemat tehnikat saab kasutada vähktõve ja nakkushaiguste diagnostikas.
• Neid tehnikaid teostatakse steriilses in vitro keskkonnas.
• Mõlemad on kiired tehnikad, mis annavad korratavaid tulemusi.
• ISH ja IHC kasutavad tuvastamismeetodeid, nagu näiteks raadiosildistamine ja fluorestsentstehnikaid.

Mis vahe on hübridiseerumisel situatsiooni ja immunohistokeemia vahel?

Olukorras hübridisatsioon vs immunohistokeemia
ISH on nukleiinhapete hübridisatsioonitehnika, mida viiakse otse läbi kudede osal või lõigul või terves koes.	IHC on tehnika, mille abil antigeenide olemasolu kindlakstegemiseks kasutatakse monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi, mis on rakupindadele asetatud spetsiaalsed valgu markerid.
Analüüsitud biomolekulide tüüp
ISH analüüsib nukleiinhappeid.	IHC analüüsib valke-antigeene.
Biokeemilise reaktsiooni alused
Selles tehnikas toimub DNA-DNA või DNA-RNA vahel täiendav aluste sidumine.	Antigeeni ja antikeha interaktsioonid osalevad immunohistokeemias.
Ensüümiga seotud tuvastamismeetodid
Ensüümiga seotud tuvastusmeetodeid ei saa ISH-s kasutada.	IHC-s saab kasutada ensüümiga seotud tuvastusmeetodeid.

Kokkuvõte - hübridiseerumine olukorras vs immunohistokeemia

Molekulaardiagnostika on kiired ja kinnitavad meetodid, mida saab kasutada selliste nakkushaiguste nagu vähk või nakkushaigused, nagu HIV või tuberkuloos, tuvastamiseks rakkudel esinevate molekulaarsete markerite põhjal, mis viivad haiguse avaldumiseni. Molekulaarsed markerid võivad esineda ekspresseeritud valkude kujul või geneetilisel tasemel, mille alusel võetakse kasutusele erinevad uudsed tehnikad tõhususe suurendamiseks ja on vähem töömahukad, ehkki nende tehnikatega kaasnevad suured kulud. Seega ISH sõltub DNA-DNA või DNA-RNA hübriidide moodustumisest ja IHC sõltub spetsiifilistest reaktsioonidest antikeha ja antigeeni vahel. See on erinevus in situ hübridisatsiooni vahel.

Laadige alla In situ hübridisatsiooni versus immunohistokeemia PDF-versioon

Selle artikli PDF-versiooni saate alla laadida ja seda võrguühenduseta otstarbel kasutada tsitaatide märkuse kohaselt. Laadige alla PDF-versioon siit. Erinevus situatsiooni hübridisatsiooni ja immunohistokeemia vahel.

Viited:

1. Duraiyan, Jeyapradha jt. "Immunohistokeemia rakendused." Ajakiri Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, august 2012, saadaval siin. Juurdepääs 24. augustil 2017.
2. “In situ hübridisatsioon (ISH).” Riiklik biotehnoloogiaalane teabekeskus, USA Riiklik Meditsiiniraamatukogu, saadaval siin. Juurdepääs 24. augustil 2017.

Pilt viisakalt:

1. „KALAD (fluorestsents olukorras hübridisatsioon)” - autor: MrMatze - Enda töö (CC BY-SA 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu
2. “Immunohistochemicalstaining2” autor Imoen ingliskeelses Vikipeedias (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedia kaudu