Mikroorganisme kasvatatakse laborites ja tööstusharudes erinevatel eesmärkidel, näiteks iseloomustamiseks, eristamiseks, identifitseerimiseks, antibiootikumide väljatöötamiseks, vaktsiinide väljatöötamiseks, transgeensete (GMO) taimede ja loomade tootmiseks ning orgaaniliste hapete ekstraheerimiseks. Neid kasvatatakse kunstlikult sünteesitud kasvukeskkonnas või looduslikes substraatides. Seetõttu tuleks valmistada erinevat tüüpi steriilsed värsked söötmed ja soovitud mikroorganisme kasvatada puhtas või segakultuuris. Söödet täiendatakse kõigi mikroorganismi kasvamiseks vajalike toitainetega. Mikroorganismi värskesse söötmesse või substraati viimist nimetatakse inokuleerimiseks. Mikroorganismi piisava kasvu saavutamiseks tuleks siiski tagada optimaalsed kasvutingimused. Protsessi, mis tagab nõutavad kasvutingimused nagu temperatuur, niiskus ja pH ning võimaldab mikroorganismidel söötmel kasvada, nimetatakse inkubatsiooniks. Seega on peamine erinevus inokuleerimise ja inkubeerimise vahel selles nakatamine on mikroorganismide viimine kasvukeskkonda või substraati samas inkubeerimine võimaldab mikroorganismidel kasvada varustatud kasvutingimustes.
1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on nakatamine
3. Mis on inkubatsioon
4. Kõrvuti võrdlus - nakatamine vs inkubatsioon tabelina
5. Kokkuvõte
Inokuleerimine on mikroorganismide viimine kasvukeskkonda, mis sobib nende kasvamiseks. Teisisõnu võib inokuleerimist määratleda kui protsessi, mille käigus patogeensed või antigeensed mikroorganismid viiakse elusorganismi, et stimuleerida antikehade tootmist. Kui inokuleerimine on lõppenud, hakkavad mikroorganismid söötmes kasvama ja paljunema, moodustades nähtavaid kolooniaid.
Mikrobioloogias kasutatakse erinevat tüüpi nakatamise vahendeid ja tehnikaid. Inokuleerimissilm, inokuleerimisnõel, puuvillast tampooni, tangid, klaasieelistused, jaoturipipetid on laborites tavaliselt kasutatavad inokuleerimisvahendid. Kõik need materjalid peaksid olema saastevabad. Seetõttu on enne inokuleerimist vaja steriliseerida need sobiva steriliseerimise tehnika abil, et vältida saastumist või soovimatute mikroorganismide kasvu söötmes. Streakplaadi meetod, leviku kohtmeetod, valamisplaadi meetod, inokuleerimine punktkultuuriga, viljakultuur, kaldkultuur on mitmed mikroobide laborites bakterite ja seente kasvatamiseks kasutatavad inokuleerimise tehnikad.
Joonis 01: Bakteri inokuleerimine vöötplaadi meetodil
Mikroorganismidel on erinevad kasvavad vajadused. Neile tuleks anda vajalikud toitained, vesi, mineraalid, kasvufaktorid, mikroelemendid ja muud kasvutingimused. Pärast mikroobide inokuleerimist värskesse söötmesse tuleks mikroorganismi kasvu toetamiseks säilitada kasvutingimused. Protsessi, mis võimaldab mikroorganismidel keskkonnas kasvada, tagades vajalikud kasvutingimused, nimetatakse inkubatsiooniks. Inokuleeritud kultiveerimisplaadid võib inkubeerimiseks asetada seadmesse, mida nimetatakse inkubaatoriks. Inkubaatorid on konstrueeritud nii, et operaator saab vastavalt mikroobinõudele reguleerida temperatuuri, niiskust, gaasi kontsentratsiooni jne..
Kui tagatakse optimaalsed tingimused, kipuvad mikroorganismid kasvama, paljunema ja paljunema, kasutades söötmes saadaolevaid toitaineid. Mikroobide kasvul on söötmes neli erinevat faasi. Pärast nakatamist initsieerivad nad mahajäänud faas. Lagufaasis ei näita mikroobid kiiret kasvu ega paljunemist. Nad hakkavad uue keskkonnaga kohanema ja seal stabiliseeruvad. Kui need on kohandatud, algab teine etapp, mis näitab mikroorganismi eksponentsiaalset kasvu. Teist etappi tuntakse kui logifaas või eksponentsiaalne faas. Logi faasis näitavad mikroobid optimaalset kasvukiirust ja paljunemist. Kolmas etapp algab pärast palgifaasi, kui söötmes on toitainete ja muude vajaduste hulk piiratud. Jooksul statsionaarne faas, kasvu- ja suremiskiirused muutuvad võrdseks ning kasvukõver on sirge, paralleelne x-teljega. Neljas etapp on surmafaas kus suremus ületab kasvumäära. Mitme päeva pärast mikroobide kasv lakkab, jättes maha surnud kultuuri.
Joonis 02: Mikroobse plaadi inkubaator
Inokuleerimine vs inkubatsioon | |
Inokuleerimine on mikroorganismide viimise või suspensiooni söötmesse viimise protsess. | Inkubatsioon on protsess, mis võimaldab nakatatud mikroorganismidel kasvada vajalikes kasvutingimustes. |
Kasutatud tööriistad | |
Inokuleerimiseks võib kasutada inokuleerimisnõelu, inokuleerimissilmuseid, puuvillavahetusvahendeid, pipette jne.. | Inkubeerida saab kultuuriruumis, inkubaatoris, kultuuririiulites jne. |
Aeg | |
Inokuleerimine viiakse läbi lühikese aja jooksul. | Inkubeerimine võtab mitu tundi kuni päevi. |
Tingimused säilitatakse | |
Inokuleerimine toimub aseptilistes tingimustes laminaarse õhukarbi sees. | Inkubeerimine toimub sobivate kasvutingimuste, nagu temperatuur, niiskus, hapniku kontsentratsioon, valgus jms, tagamisega. |
Inokuleerimine ja inkubeerimine on kaks peamist sammu mikroorganismide kasvatamisel laborites. Inokuleerimine on mikroorganismi viimine sobivasse söötmesse või substraati. Inokuleeritud söötmele on ette nähtud kasvamiseks ja paljunemiseks sobivad kasvutingimused. Seda protsessi nimetatakse inkubatsiooniks. See on peamine erinevus inokuleerimise ja inkubeerimise vahel. Mikroobilaborites on inkubatsiooni jaoks spetsiaalsed tööriistad ja seadmed. Inkubaator on seade, mis võimaldab mikroorganismidel kasvada kontrollitud temperatuuril, õhutamisel, niiskusel jne. Inokuleerimine ja inkubeerimine tuleks läbi viia sobivates aseptilistes tingimustes, et vältida saastumist ja ajaraiskamist..
Selle artikli PDF-versiooni saate alla laadida ja seda võrguühenduseta otstarbel kasutada tsitaatide märkuste kohaselt. Laadige alla PDF-versioon siit. Inokuleerimise ja inkubatsiooni erinevus.
1. „BAKTERIA KASVU NÄITAMISEKS KÄSITLEVAD EKSPERIMENDID - põhitehnikad.“ Mikrobioloogilised tehnikad - põhitõed. N.p., n.d. Võrk. Saadaval siin. 07. juuni 2017.
2. “Kasvutempo ja temperatuur - piirideta avatud õpik.” Piirideta. Piirideta, 17. august 2016. Veeb. Saadaval siin. 07. juuni 2017.
1. “Vööriplaadid” (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedia kaudu
2. “Mikrobioloogiliste plaatide inkubaator-02” pärisnimega: Matylda Sękpl.wiki: Cygaretkacommons: Cygaretka - Oma töö (CC BY-SA 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu