Erinevus RP HPLC ja HIC vahel

võtme erinevus RP HPLC ja HIC vahel on see RP HPLC kasutab polaarsemat liikuvat faasi ja vähem polaarset statsionaarset faasi. Arvestades, et HIC kasutab hüdrofoobset statsionaarset faasi, mis võimaldab hüdrofoobsetel molekulidel selle külge kinnituda.

Kromatograafia on analüütiline meetod, mis aitab segu lahutada selle komponentideks. Esiteks peame lahutatava proovi lahustama lahuses. Seda lahuse ja aine segu nimetatakse liikuvaks faasiks. Seejärel juhitakse liikuv faas läbi teise materjali, mida nimetatakse statsionaarseks faasiks. Statsionaarne faas määrab komponentide eraldamise. Eraldamine toimub materjali jagunemise tõttu liikuva faasi ja statsionaarse faasi vahel.

SISU

1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on RP HPLC
3. Mis on HIC?
4. Kõrvuti võrdlus - RP HPLC vs HIC tabelina
5. Kokkuvõte

Mis on RP HPLC?

Mõiste RP HPLC tähistab Pöördfaasi suure jõudlusega vedelikkromatograafia. See hõlmab segu komponentide eraldamist vastavalt hüdrofoobsusele. Liikuvas faasis olevad hüdrofoobsed komponendid seostuvad statsionaarses faasis olevate immobiliseeritud hüdrofoobsete ligandidega, hüdrofiilsed komponendid aga elueeruvad statsionaarse faasi kaudu kinnitumata statsionaarse faasi pinnale..

Joonis 01: HPLC seade

Pealegi on sellel meetodil teiste kromatograafiliste meetoditega võrreldes suurem reprodutseeritavus ja see on ka laialdaselt kasutatav. Seetõttu kasutame seda meetodit laboratooriumides üle 75% kõigist HPLC meetoditest. Enamasti kasutame liikuva faasina vee vesisegu koos seguneva polaarse orgaanilise lahustiga. Seega tagab see lahuses olevate hüdrofoobsete komponentide kinnitumise statsionaarse faasi pinnale.

Mis on HIC?

Mõiste HIC tähistab Hüdrofoobse interaktsiooni kromatograafia. See on pöördfaasi HPLC tüüp ja seda meetodit kasutatakse peamiselt suurte biomolekulide, näiteks valkude eraldamiseks. Selle meetodi puhul peame biomolekuli proovi valmistamiseks kasutama vesikeskkonda. Selle põhjuseks on asjaolu, et orgaanilised lahustid võivad põhjustada valkude denatureerimist. Veelgi enam, see meetod kasutab interaktsiooni suurte molekulide vahel statsionaarse faasi kergelt hüdrofoobse pinnaga. Lisaks peame proovis kasutama kõrget soolakontsentratsiooni, kuna see soodustab valgu säilimist pakendil; seda protsessi nimetatakse soolamiseks. Soola kontsentratsiooni järk-järgult vähendades saame panna biomolekulid elueeruma eraldi vastavalt nende hüdrofoobsusele.

Tavaliselt kasutatakse selle meetodi tingimustes ioonivahetuskromatograafiat. Selle meetodi puhul peame esmalt puhverlahuse läbi kolonni laskma, et vähendada lahustunud aine lahustumist proovis. See paneb valgu hüdrofoobsed piirkonnad paljastama. Kui aga molekul on hüdrofoobsem, on seondumise soodustamiseks vaja vähem soola. Siin elueeritakse kõigepealt vähem hüdrofoobseid lahustunud aineid ja vastavalt soola kontsentratsiooni muutusele elueeritakse viimasena rohkem hüdrofoobseid lahustunud aineid.

Mis vahe on RP HPLC ja HIC vahel??

Kromatograafia on analüütiline meetod segu komponentide eraldamiseks. RP HPLC ja HIC on kaks spetsiaalset kromatograafiatehnikat. RP HPLC ja HIC vahel on peamine erinevus selles, et RP HPLC kasutab polaarsemat liikuvat faasi ja vähem polaarset statsionaarset faasi, samas kui HIC kasutab hüdrofoobset statsionaarset faasi, mis võimaldab hüdrofoobsetel molekulidel selle külge kinnituda.

Allpool toodud infograafik võtab kokku erinevuse RP HPLC ja HIC vahel.

Kokkuvõte - RP HPLC vs HIC

Viide:

1. HPLC eraldusrežiimid. Veed, saadaval siit.

Pilt viisakalt:

1. „Preparative HPLC” autor: GYassineMrabetTalk & # x2709; See W3C-määratlemata vektorpilt loodi Inkscape abil. - Oma töö (CC BY 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu

Teadus ja loodus