Erinevus RPMI ja DMEM vahel

Peamine erinevus - RPMI vs DMEM
 

Enamik teadusuuringuid hõlmab loomade rakkude kasvatamist ja seetõttu nõuavad need uuringud loomade rakuliinide säilitamist spetsiaalsetes kasvutingimustes. Loomarakkude kultiveerimist kasutatakse laialdaselt farmakoloogilistes uuringutes ravimite metabolismi tuvastamiseks, haiguste diagnostikas ja vähiuuringutes. Rakukultuurisööde on loomade rakukultuuri oluline aspekt. Dulbecco modifitseeritud kotka sööde (DMEM) ja Roswelli pargi mälestusinstituudi keskmine (RPMI) on kaks söötmet, mida kasutatakse loomarakkude kasvatamisel. RPMI on sööde, mida kasutatakse laialdaselt imetajate rakkude kultiveerimiseks suspensioonikultuuris. DMEM on modifitseeritud tüüpi põhikeskkond, mille aminohapete ja vitamiinide kontsentratsioon on suurenenud kuni neljakordseks. DMEM-i kasutatakse rakkude kasvatamiseks külgnevates kultuurides. Peamine erinevus kahe meedia vahel on meediumikultuuri tüüp. RPMI-d kasutatakse suspensioonikultuurides, samas kui DMEM-i kasutatakse kleepuvate rakkude kultiveerimiseks.

SISU

1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on RPMI
3. Mis on DMEM
4. RPMI ja DMEMi sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - RPMI vs. DMEM tabelina
6. Kokkuvõte

Mis on RPMI?

RPMI või Roswelli pargi mälestusinstituudi keskkonda nimetatakse ka RPMI 1640. Meedia nimi tuletati instituudist, kus meedia avastati. Seda söödet kasutatakse tavaliselt loomade rakukultuuris, eriti imetajate rakkude kasvatamiseks. Need töötati algselt välja inimese lümfotsüütide kasvatamiseks.

RPMI on lisatud järgmised koostisosad.

• Glükoos
• pH indikaator (fenoolpunane) \
• Soolad (naatriumkloriid, naatriumvesinikkarbonaat, dinaatriumfosfaat, kaaliumkloriid, magneesiumsulfaat ja kaltsiumnitraat)
• Aminohapped
• Vitamiinid (i-inositool, koliinkloriid, para-aminobensoehape, foolhape, nikotiinamiid, püridoksiinvesinikkloriid, tiamiinvesinikkloriid, kaltsiumi pantotenaat, biotiin ja riboflaviin, tsüanokobalamiin)

RPMI eripäraks on fosfaadi suurenenud kontsentratsioon söötmes. RPMI kasutatakse 5% süsinikdioksiidi atmosfääris. See tagab rakkude kasvu jaoks maksimaalsed ja optimaalsed tingimused. Söötme pH hoitakse vesinikkarbonaadi puhversüsteemi abil väärtusel 8,0.

Joonis 01: Rakukultuur Petri tassil

RPMI rakendused rakkude kasvatamisel

• Inimese T- ja B-lümfotsüütide, luuüdi rakkude ja hübridoomi kultiveerimine.
• Kasutatakse inimese neoplastiliste rakkude uurimiseks.

Mis on DMEM?

Dulbecco modifitseeritud kotka sööde (DMEM) on modifitseeritud sööde, mis on kaubanduslikult valmistatud. Keskmise pulbri algne tekstuur on kollane. DMEM-is suurendatakse vitamiinide kontsentratsiooni neljakordseks, suurendades söötme toitainesisaldust.

DMEM-i modifitseeritakse ka, lisades rohkem sooli nagu raud (III) nitraat, naatriumpüruvaat ja mõned asendamatud aminohapped nagu seriin ja glütsiin. Samuti muudetakse söötmes glükoosi koostist. Algne koostis koosneb 1000 mg / l glükoosist, samas kui DMEM-is suurendatakse kontsentratsiooni 4500 mg / l. DMEM nõuab ka seerumi söötme täiendamist, kuna see ei ole täielik sööde. Kõige sagedamini täiendatakse DMEM veise loote seerumiga (FBS). FBS pakub kultiveerimisprotsessi jaoks vajalikke valke ja kasvufaktoreid.

Söötme pH varieerub sõltuvalt naatriumvesinikkarbonaadi lisamisest. Söötme pH on enne naatriumvesinikkarbonaadi lisamist umbes 6,80 - 7,40, samas kui pH pärast naatriumvesinikkarbonaadi lisamist on vahemikus 7,60 - 8,20. Söötme säilitustemperatuur on 2–8 ⁰C.

Joonis 02: DMEM

DMEM rakendused

• Polüoomiviiruse naastude moodustamise võime uurimine hiire embrüonaalsetes rakkudes.
• Kontaktinhibitsiooni uuringud.
• Uurimisel ja analüüsimisel kanarakkude kultuurid.

Millised on RPMI ja DMEMi sarnasused??

• Loomade rakukultuuris kasutatakse nii RPMI kui ka DMEM.
• Nii RPMI kui ka DMEM söötmed on vedelad ravimvormid.
• Nii RPMI kui ka DMEM söötmed sisaldavad kasvu jaoks hädavajalikke aminohappeid, vitamiine ja anorgaanilisi sooli.
• Nii RPMI kui ka DMEM meediumid on puudulikud. Seetõttu tuleks lisada seerumit.
• Nii RPMI kui ka DMEM söötmed kasutavad süsinikuallikana glükoosi.
• Nii RPMI kui ka DMEM söötmetel on kõrgem pH.

Mis vahe on RPMI ja DMEM vahel??

RPMI vs DMEM
RPMI on sööde, mida kasutatakse laialdaselt imetajate rakkude kultiveerimiseks suspensioonikultuuris.	DMEM on modifitseeritud tüüpi põhikeskkond, kus on suurenenud aminohapete ja vitamiinide kontsentratsioon.
Lisafosfaatide olemasolu
Esineb RPMI-s.	Puudub DMEM-is.
Kasutage
Inimese T- ja B-lümfotsüütide, luuüdi rakkude ja hübridoomi kultiveerimine. Kasutatakse inimese neoplastiliste rakkude uurimiseks.	Kasutatakse rakkude kultiveerimiseks külgnevates kultuurides. On harjunud, uurida polüoomiviiruse naastude moodustamise võimet hiire embrüonaalsetes rakkudes. uuringu kontakti pärssimine. kanarakultuuride uurimine ja analüüsimine.
Kultuuri liigid
Suspensioonikultuuride jaoks kasutatakse RPMI-d.	DMEM-i kasutatakse rakkude külge kleepunud kultuuride korral.

Kokkuvõte - RPMI vs DMEM

Nii RPMI kui ka DMEM kasutatakse laialdaselt loomarakkude kultiveerimisel, eriti loomade rakuliinide, sealhulgas lümfotsüütide kasvatamiseks in vitro. DMEM on modifitseeritud põhisööde, kus on suurenenud toitainete kontsentratsioon. RPwell, mille on välja töötanud Roswell Parki Memoriaalinstituut, ning see on ka sööde, mida kasutatakse loomarakkude kasvatamisel, eriti imetajate lümfotsüütide jaoks. Mõlemad meediumid on müügil. See erinevus on RPMI ja DMEM vahel.

Viide:

1. „RPMI Media - RPMI-1640 Media“. Sigma-Aldrich. Saadaval siin  
2. “Dulbecco modifitseeritud kotka sööde - DME, DMEM.” Sigma-Aldrich. Saadaval siin

Pilt viisakalt:

1.'Kultuuri kultuur pisikeses Petri dis'By kaibara87-s - algselt postitatud Flickrile rakukultuurina (CC BY 2.0) Commonsi Wikimedia kaudu 
2.DMEM rakukultuuri söödeBy Lilly_M - Oma töö (CC BY-SA 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu