võtme erinevus rakkude koguarvu ja elujõuliste rakkude arvu vahel on see rakkude koguarvuga hinnatakse kõiki rakke, sealhulgas nii elusaid kui ka surnud mikroobirakke proovis, elujõuliste rakkude arvu järgi hinnatakse ainult proovis olevaid elusaid mikroobirakke.
Enamiku katsetööde jaoks peetakse vajalikuks organismide arvu loendamist populatsioonis. Seetõttu proovime mikroobide arvu proovis analüüsida otseseid ja kaudseid meetodeid kasutades. Otsene mõõtmine hõlmab meetodeid, mis loendavad rakkude arvu otse. Kaudsed mõõtmised hõlmavad mõne parameetri, mida saab seostada rakkude arvuga, nagu rakkude tihedus, kuivmass jne, mõõtmist. Mõne meetodi abil kvantifitseeritakse ainult proovis olevad elusad mikroobrakud. Üks sellistest meetoditest on elujõuline rakkude arv. Otsesed mikroskoopilised loendused määravad kõik rakud teadaolevas söötme / proovi mahus mikroskoobi abil. Seetõttu loeb see nii elavaid kui ka surnud rakke. See on rakkude koguarvu tüüp.
1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on rakkude koguarv
3. Mis on elujõuline rakkude arv
4. Lahtrite koguarvu ja elujõulise kärgede arvu sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - rakkude koguarv vs elujõuline rakkude arv tabelina
6. Kokkuvõte
Rakkude koguarv on meetod, mis hõlmab kõigi rakkude loendamist teadaolevas söötme / proovi mahus, kasutades mikroskoopi ja loenduskambrit (hemotsütomeeter). Erinevalt elujõulisest loendusest loendatakse nii elavaid kui ka surnud rakke. Seetõttu on see koguarv, välja arvatud juhul, kui vaatluse ajal rakendatakse elujõulisust. Mikroskoopia käigus jälgitakse rakke otse mikroskoobi all ja loendatakse. See kasutab rakususpensiooni, mis koosneb mikroobsetest rakkudest. Loendamise ja täpsete mõõtmiste hõlbustamiseks võib proovi lahjendada. Rakkude väga kõrge / madala kontsentratsiooni korral on rakkude koguarvu saamine mikroskoobi abil keeruline ülesanne.
Joonis 01: loenduskamber - hemotsütomeeter
Loenduskambrid on rakkude koguarvu arvestamiseks lihtsad, odavad ja kiired. Kõige tähtsam on see, et loendamiskambrid on kasulikud nii eukarüootide kui ka prokarüootide loendamiseks. Rakkude koguarvu kvantifitseerimiseks loendame rakud valitud ruumalades teadaoleva ruumalaga.
Elujõuliste rakkude arv on meetod elusate mikroobsete rakkude loendamiseks proovis. See loeb ainult valimis olevad elusad rakud. Elujõuliste plaatide arv, membraanfiltreerimine ja kõige tõenäolisem arv on vähesed elujõulised rakkude loendamise tehnikad. Need lähenemisviisid põhinevad kasvule. Elujõuline plaatide loenduse meetod on võimas meetod, mida kasutatakse paljudes mikrobioloogia valdkondades, sealhulgas toidu- ja piimatoodete mikrobioloogias, meditsiinilises mikrobioloogias, keskkonna mikrobioloogias, mikroobide geneetikas, kasvukeskkonna arendamisel ja biotehnoloogias.
Kõige tavalisem viis elujõuliste bakterite loendamiseks on kasutada proovi, mis on võimeline moodustama kolooniaid agarsöötmel. Plaatide loendamise tegemiseks on kaks peamist viisi: plaadimistehnika ja plaatmeetod. Teadaoleva koguse proovi võib laotada agarplaadi pinnale või segada agarisse. Seejärel inkubeeritakse plaati ja tekkinud kolooniad loendatakse. Kolooniate arv on seotud mikroorganismide arvuga algses proovis. Elujõuliste arvuga mõõdetakse ainult neid rakke, mis on elusad ja kasvavad.
Joonis 02: elujõuline plaatide arv
Kõige tõenäolisem arv (MPN) on alternatiiv plaatide loendusmeetoditele elujõuliste rakkude asustustiheduse hindamiseks. See loendab vedelas kultuuris kasvavaid organisme ja on seega valdavalt bakterioloogiline tehnika. See on eriti kasulik organismide madala kontsentratsiooni korral, nt. piim, joogivesi.
Membraani filtreerimistehnika on sobivam, kui mikroobid on väga lahjad nagu linna veevarustuses. See viiakse läbi lihtsalt juhtides teada oleva vedeliku mahu läbi filtri ja inkubeerides seda toitekeskkonnal. Filtril arenenud kolooniad loendatakse ja arvutatakse bakterid proovi milliliitri kohta.
Rakkude koguarv loetleb proovis kõik elusad ja surnud mikroobrakud. Seevastu elujõuliste rakkude arv loetleb ainult proovis olevad elusad rakud. Niisiis, see on peamine erinevus rakkude koguarvu ja elujõuliste rakkude arvu vahel. Rakkude koguarv ei sõltu kolooniate kasvust agariplaatidel, samal ajal kui elujõuliste rakkude arv on kasvupõhine tehnika ja see sõltub mikroobsete kolooniate kasvust agariplaatidel.
Allpool toodud infograafiline ülevaade võtab kokku rakkude koguarvu ja elujõuliste rakkude arvu erinevuse.
Rakkude koguarv loendab nii elusaid kui ka surnud mikroobirakke, elujõuliste rakkude arv aga ainult elusaid rakke. Seega on see peamine erinevus rakkude koguarvu ja elujõuliste rakkude arvu vahel. Samuti on elujõuliste rakkude arv erinevalt rakkude koguarvust kasvupõhine tehnika. Veelgi enam, see nõuab plaatide inkubeerimist kuni nähtavate kolooniate saamiseni. Elujõuliste rakkude arv, MPN ja membraanfiltreerimine on vähe elujõuliste rakkude loendamise meetodeid, samas kui otsene mikroskoopia ja hemotsütomeetri kasutamine on raku koguarvu kaks tehnikat.
1. “Bakterite loendamine”. Luumen, saadaval siit.
1. Toddi “Hemotsütomeeter” - postitati Commons Wikimedia kaudu Flickrile numbriga 0356 (CC BY-SA 2.0)
2. “Verdünnungsreihe mit Ausplattieren” - autor Leberechtc - Enda töö (CC BY 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu