Erinevus konkureeriva ja mittekonkureeriva ELISA vahel

võtme erinevus konkureeriva ja mittekonkureeriva ELISA vahel on see konkureeriv ELISA kasutab inhibeerimisantigeeni, samas kui konkureeriv ELISA ei kasuta analüüsis inhibeerimisantigeeni.

Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs (ELISA) on immunoloogiline test, mis tuvastab mitmesuguseid sihtmärke, näiteks antikehi, antigeene, valke ja glükoproteiine. See on kiire ja lihtne toimimisviis. Seetõttu kasutatakse seda sagedamini teadusuuringute ja diagnostilistel eesmärkidel. ELISA hõlmab ensüümide kasutamist ning antikeha ja antigeeni spetsiifilist seondumist. Reaktsioonide toimumise põhjal on ELISA tüüpi neli: otsene ELISA, kaudne ELISA, kihiline ELISA ja inhibeeriv ELISA. Otsene, kaudne ja kihiline ELISA on mittekonkurentsivõimelise ELISA tüüp, samas kui inhibeerimise ELISA on komplementaarse ELISA tüüp. Selle artikli peamine eesmärk on arutada konkurentsi- ja mittekonkureeriva ELISA erinevust.

SISU

1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on võistlev ELISA?
3. Mis on mittekonkurentsivõimeline ELISA
4. Konkurentsivõimelise ja mittekonkureeriva ELISA sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - võistlev ja mittekonkurentsiline ELISA tabelina
6. Kokkuvõte

Mis on võistlev ELISA??

Konkurentsivõimeline ELISA mõõdab antigeeni kontsentratsiooni proovis signaalihäirete tuvastamise kaudu. Selles testis kasutatakse inhibiitori antigeeni. Seega on see teatud tüüpi pärssimise ELISA. Selle protseduuri ajal konkureerivad proovis olevad antigeenid valitud võrdlusantigeeniga spetsiifilises koguses märgistatud antikehaga seondumisel. Lisaks algab see protseduur proovi inkubeerimisega märgistatud antikeha ülemäärase kogusega. Samuti tuleks võrdlusantigeen eelnevalt katta mitmekordse süvendiga prooviplaadil. Seejärel tuleks proovisegu lisada prooviplaadile, mis sisaldab võrdlusantigeeni. Vabad antikehad seostuvad võrdlusantigeeniga sõltuvalt antigeeni kogusest proovis. Seega, kui antigeen on rohkem proovis, tuvastatakse vähem antigeeni. Seega loob see nõrgema signaali.

Joonis 01: ELISA

Vastupidiselt, kui proov sisaldab vähem antigeeni, hõivab üha enam võrdlusantigeeni antikehadega ja annab tugeva signaali. Kuna konkureeriv ELISA annab tugevama signaali juhul, kui proov sisaldab vähe antigeene, on konkureeriv ELISA väga tundlik test isegi väikese antigeenide arvuga proovide korral.

Mõnes konkureerivas ELISA komplektis kasutatakse märgistatud antikeha asemel märgistatud antigeeni. Siin konkureerivad märgistatud antigeen ja proovi antigeen primaarse antikehaga seondumise eest. Samamoodi, kui proovis on vähe antigeeni, on antikehadega seonduva märgistatud antigeeni kogus suurem ja see loob tugevama signaali.

Mis on mittekonkurentsivõimeline ELISA?

Nelja ELISA tüübi hulgas on mittekonkurentsivõimelised ELISA tüübid kolm. Need on otsese ELISA, kaudse ELISA ja võileiva ELISA. Kõik kolm vormingut töötavad ELISA üldpõhimõtte kohaselt, nende metoodikates on erinevused.

Otsene ELISA kasutab ensüümiga märgistatud primaarset antikeha. Seega ei vaja see sekundaarset antikeha. Seetõttu on otsene ELISA kiirem kui muud tüüpi ELISA. Primaarne antikeha seostub otseselt plaadil oleva immobiliseeritud sihtantigeeniga. Seega toimub ensüümi-substraadi reaktsioon, mis annab nähtava signaali.

Joonis 02: Võileiva ELISA

Erinevalt otsesest ELISA-st kasutab kaudne ELISA märgistamata primaarset antikeha ja ensüümiga märgistatud sekundaarset antikeha. Kui primaarne antikeha seondub immobiliseeritud antigeeniga, siis sekundaarne antikeha seondub primaarse antikehaga. Teisese antikeha ensüüm reageerib antigeeniga ja annab nähtava signaali. Sandwich-ELISA erineb nii otsesest kui ka kaudsest ELISA-st. Siin immobiliseeritakse antikeha testplaadi seina külge.

Millised on konkureeriva ja mittekonkureeriva ELISA sarnasused??

• Konkurentsivõimeline ja mittekonkurentsiline ELISA on kahte tüüpi immunosorbtiivsed analüüsimeetodid.
• Need on väga paindlikud ja tundlikud tehnikad.
• Lisaks on nii konkureeriv kui ka mittekonkureeriv ELISA ensüümiga seotud immunotestid.
• Samuti genereerivad mõlemad meetodid signaali ensüümi-substraadi reaktsiooni tõttu.

Milline on erinevus konkureeriva ja mittekonkureeriva ELISA vahel??

Konkurentsivõimeline ELISA on teatud tüüpi ELISA, mis põhineb analüüdi antigeeni ja märgistatud antigeeni valmimisel piiratud koguse spetsiifiliste antikehade jaoks. Teisest küljest puudub selline konkurents huvipakkuva antigeeni ja võrdlusantigeeni vahel mittekonkurentsilises ELISA-s. Seega on see peamine erinevus konkureeriva ja mittekonkureeriva ELISA vahel. Samamoodi on konkureeriv ELISA pärssiv ELISA, mittekonkurentsiline ELISA aga pärssiv ELISA. Niisiis, see on ka erinevus konkureeriva ja mittekonkureeriva ELISA vahel.

Lisaks on konkureeriv ELISA sobivam huvipakkuva antigeeni väikese koguse mõõtmiseks. See on tundlik meetod. Teisest küljest ei sõltu mittekonkurentsivõimeline ELISA proovis olevate antigeenide arvust. Seetõttu on see erinevus ka konkureeriva ja mittekonkureeriva ELISA vahel.

Allpool infograafik selgitab konkurentsi- ja mittekonkureeriva ELISA erinevust suhteliselt.

Kokkuvõte - Konkurentsivõimeline ja mittekonkureeriv ELISA

Konkurentsivõimeline ja mittekonkureeriv ELISA on ELISA või ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi kaks peamist tüüpi. Konkurentsivõimelise ja mittekonkureeriva ELISA erinevuse kokkuvõtmisel tugineb konkureeriv ELISA huvipakkuva antigeeni ja võrdlusantigeeni vahelisele konkurentsile piiratud koguse antikehade vahel. Seetõttu nimetatakse konkureerivat ELISA-d ka inhibeerivaks ELISA-ks. Teisest küljest ei sõltu mittekonkurentsivõimeline ELISA siht-antigeenide ja võrdlusantigeenide vahelisest konkurentsist. See kasutab huvipakkuva analüüdi poole liigset märgistatud spetsiifilist antikeha. Seega on see peamine erinevus konkureeriva ja mittekonkureeriva ELISA vahel. Otsene ELISA, kaudne ELISA ja võileiva ELISA on mittekonkurentsivõimelise ELISA kolm peamist tüüpi.

Viide:

1. Bio-Rad. “ELISA tüübid | Bio-Rad. ” Bio, saadaval siit.
2. ELISA neli tüüpi. Cusabio Life Science - teie bioloogia teaduspartner, saadaval siit.

Pilt viisakalt:

“Elisa tipus” autor Carolfv333 - Oma töö (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
Nickwichi võileivaimmuuring, ELISA - oma töö (CC BY-SA 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu