Gram-pepu ja happekiire erinevus

Peamine erinevus - grammipesu vs happeline
 

Bakterid on väga väikesed mikroorganismid. Need on läbipaistvad ja nende tuvastamine on elavates ja pesemata tingimustes keeruline. Seega on bakterite tuvastamise hõlbustamiseks välja töötatud erinevad värvimismeetodid. Värvimistehnikaid on kolme peamist tüüpi: lihtne värvimine, diferentsiaalvärv ja struktuurne värvimine. Diferentsiaalvärvimine on meetod, mille abil bakterite eristamiseks kasutatakse rohkem kui ühte plekki. Gram- ja happekiiret plekki tuntakse kõige rohkem diferentsiaalplekkidena. Gram-värvimine on diferentsiaalvärvimistehnika, mis jagab bakterid kahte rühma, mida nimetatakse grampositiivseteks ja gramnegatiivseteks bakteriteks. Happekindel plekk on diferentsiaalplekk, mida kasutatakse happekiiruseliste organismide, näiteks Mycobacterium identifitseerimiseks happevabadest organismidest. See on peamine erinevus grammi- ja happekiirguse vahel.

SISU

1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on grammipeits 
3. Mis on happekindel
4. Grami peitsi ja happekiire sarnasused
5. Võrdlus kõrvuti - tabelina esitatud grammilakk vs happekiirus
6. Kokkuvõte

Mis on grammipeits?

Grammvärv on oluline diferentsiaalvärvimismeetod, mida kasutatakse bakterite identifitseerimiseks mikrobioloogias. Selle meetodi tutvustas Taani bakterioloog Hans Christian Gram 1884. aastal. Gram-värvimine liigitab bakterid kahte suurde rühma - grampositiivsed ja gram-negatiivsed -, mis on bakterite klassifitseerimisel ja tuvastamisel väga olulised. Mikrobioloogid viivad uuringute ajal bakterite iseloomustamise algstaadiumisse grammi värvimist.

Bakterid rühmitatakse vastavalt nende rakuseina erinevustele. Gram-positiivsed bakterid koosnevad nende rakuseinas paksust peptidoglükaani kihist, gram-negatiivsed bakterid aga nende rakuseinas õhukesest peptidoglükaani kihist. Grammi värvimise tulemus põhineb rakuseina peptidoglükaani kihi paksuse erinevusel.

Grammi värvimiseks kasutatakse nelja erinevat reagenti, nimelt; esmane plekk, peits, värvaine ja vastuplekk. Peamisteks ja vastuplekkideks kasutatakse kristallvioletti ja safraniini, peiteaine ja värvitõmbajana vastavalt grammi joodi ja 95% alkoholi. Grammi peitsimise põhietapid on järgmised;

1. Puhtal klaasiklaasil valmistatakse bakterimuld, see fikseeritakse ja jahutatakse.
2. Praht ujutatakse kristallvioletiga 1-2 minutit.
3. Plekid loputatakse aeglase voolava kraaniveega.
4. Grammi joodi kantakse määrdumisele 1 minut.
5. Plekid loputatakse aeglase voolava kraaniveega
6. Plekki pestakse 95% alkoholiga 2–5 sekundit ja loputatakse aeglase voolava kraaniveega.
7. Plekid värvitakse safraniiniga 1 minut
8. Plekid loputatakse aeglase voolava kraaniveega, kuivatatakse ja jälgitakse mikroskoobi all.

Grammi värvimise lõpus täheldatakse gram-negatiivseid baktereid roosa värviga, grammi positiivseid baktereid aga lilla värviga.

Joonis 01: gramnegatiivsed ja grampositiivsed bakterid

Grami peitsimise tulemuse määrab peptidoglükaani kihi paksus nende rakuseinas. Värvitustamisetapi käigus eemaldatakse gram-negatiivsetest bakteritest primaarne plekk ja peitsmaterjal kergesti ning muutuvad värvituks, kuna neil on õhuke peptidoglükaani kiht. Primaarne plekk säilib gram-positiivsetes bakterites, kuna neil on paks peptidoglükaani kiht. Vastuvärv ei ole primaarse peetumise tõttu gram-positiivsete bakterite jaoks efektiivne. Seega on grammi positiivsed bakterid nähtavad primaarse värvusega, see tähendab lilla värviga. Vastuvärv plekitab gram-negatiivseid baktereid ja need on nähtavad valimisvärvi, mis on safraniini värv. Seetõttu on baktereid lihtne liigitada grammi järgi petrooleumi järgi kahte rühma ning see on väärtuslik bakterite eristamisel ja tuvastamisel.

Mis on happekindel?

Happekindlus on teatud bakterite füüsikaline omadus, eriti nende vastupidavus hapete värvitustamisele värvimisprotseduuride ajal. Pärast värvimist peavad need organismid lahjendatud happe- ja / või etanoolipõhiseid värvimisprotseduure vastu paljudes värvimisprotokollides. Seega antakse neile organismidele nimi "happeliselt kiire". See omadus on näidatud tänu sellele, et nende rakuseintes on kõrge vahajas materjali (mükoolhapete) sisaldus. See test on esmatähtis Mycobacterium tuberculosis.

Joonis 2: happeliselt kiired mükobakterid

Selle happekindla peitsi töötas välja Paul Ehrlich 1882. aastal. Ehrlichi happekindlat tehnikat muutis Ziehl-Neelsen ja seda kasutatakse nüüd sagedamini. Happeline kiire värvimise protseduur hõlmab kolme erinevat reagenti. Peamise peana kasutatakse karbooli fuschini. Värvitustava ainena kasutatakse happelist alkoholi. Vastuvärvina kasutatakse metüleensinist. Värvimisprotseduur viiakse läbi järgmiselt.

1. Primaarne plekk (carbol fuchsin) kantakse slaidil fikseeritud proovile (kõik lahtrid värvitakse punase värviga).
2. Slaidi kuumutatakse aurutamisega 5 minutit, mis viib plekid korralikult rakkudesse.
3. Seejärel lisatakse värvaine lahus (see eemaldab punase värvaine kõigist rakkudest, välja arvatud happeliselt kiired bakterid).
4. Metüleensinist lisatakse vastuplekkina (see värvib kõiki värvitud bakterirakke).
5. Happelised kiired bakterid jäävad punaseks, mittehapped kiired bakterid aga siniseks.

Millised on sarnasused grammipesu ja happekiire vahel?

• Gram-plekki ja kiire happega värvimine on kaks erinevat värvimismeetodit.
• Mõlemad meetodid jagavad bakterid kahte rühma.
• Mõlemad tehnikad kasutavad kahte peitsi ja ühte värvitust.

Mis vahe on grammipleki ja happekiire vahel??

Gram plekk vs hape kiire
Gram-värvimine on diferentsiaalvärvimistehnika, mis jagab bakterid kahte rühma grampositiivsed ja gramnegatiivsed bakterid.	Acid Fast plekk on diferentsiaalpeits, mida kasutatakse happekindlate organismide identifitseerimiseks mittehapete kiiretest organismidest.
Esmane plekk
Kristallviolet on grammi värvimisel tavaliselt kasutatav esmane plekk.	Karbooli fuksiin on peamine hapetes kasutatav plekk.
Värvaine
Grammi peitsis värvuse eemaldajana kasutatakse 95% alkoholi.	Hapu alkoholi kasutatakse värvuse muutmise ainena happeliselt kiiresti.
Counter plekk
Gram-peits kasutab vastuplekkina safraniini.	Happeline kiire peits kasutab vastuplekkina metüleensinist.
Vaatlus
Gramnegatiivseid baktereid täheldatakse valitud värvitoonides ja gram-positiivseid baktereid lilla värvusega.	Happekiireid baktereid täheldatakse punase värvusega ja happevabasid baktereid sinise värvusega.

Kokkuvõte - Gram Stain vs Acid Fast

Mikroorganismide visualiseerimine elavas olekus on keeruline. Seetõttu kasutatakse nende omaduste uurimiseks laialdaselt bioloogilisi plekke ja värvimisprotseduure. Diferentsiaalvärvimine on bakterite eristamiseks kasutatav üks värvimismeetod. Gram- ja happekiire värvimine on kaks erinevat värvimismeetodit. Grammvärvimine eristab gram-negatiivseid baktereid ja gram-positiivseid baktereid nende rakuseinte paksuse põhjal. Happeline kiire värvimine eristab happekiiruselisi baktereid mittehapetest kiiretest bakteritest, tuginedes rakumüüri mükoolhappe sisaldusele. See on erinevus happelise kiire ja grammi sisaldava peitsi vahel.

Laadige alla versioon Gram Stain vs Acid Fast

Selle artikli PDF-versiooni saate alla laadida ja seda võrguühenduseta otstarbel kasutada tsitaatide märkuse kohaselt. Laadige siit alla PDF-versioon. Erinevus grammi- ja happekiiruse vahel.

Viited:

1. Aryal, Sagar. "Happekindel plekk - põhimõte, protseduur, tõlgendamine ja näited." Online märkused mikrobioloogia kohta. N.p., 8. mai 2017. Veeb. Saadaval siin. 20. juuli 2017.
2. Erinevad plekid bakterite tuvastamiseks: grammi-, happe- ja endospoor. N.p., n.d. Võrk. Saadaval siin. 20. juuli 2017.

Pilt viisakalt:

1. Yala Rosen (lümfisõlm - ebatüüpiline mükobakteriaalne infektsioon (MAI) - AFB plekk) Flickri kaudu
2. Y tambe “Gram plein 01” - Y tambe fail (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedia kaudu