Erinevus HPLC ja kiire HPLC vahel

võtme erinevus HPLC ja kiire HPLC vahel on see pumba rõhk, mida me kasutame HPLC jaoks, on umbes 40 MPa, samas kui kiire HPLC jaoks on pumba rõhk umbes 3-5 MPa.

Kõige tavalisem meetod, mida segu segude eraldamisel kasutame, on vedelikkromatograafia. Selle eesmärgi saavutamiseks on mitu tehnikat, millest HPLC on väga populaarne. HPLC tähistab kõrgtehnoloogilist vedelikkromatograafiat, mis tuvastab, kvantifitseerib ja eraldab vedeliku segu komponendid kiiresti ja tõhusalt. Kiire HPLC on HPLC eriline rakendus, mis on lahenduste uurimisega seotud isikute tähelepanu hiljaaegu pälvinud.

SISU

1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on HPLC
3. Mis on kiire HPLC
4. Kõrvuti võrdlus - HPLC vs kiire HPLC tabelina
5. Kokkuvõte

Mis on HPLC?

HPLC on kõrgsurvevedelikkromatograafia. Lahustite surumiseks nii, et need läbivad kolonni, kasutatakse kõrgsurvet. Samuti on see ideaalne viis erinevate ühendite, näiteks aminohapete, nukleiinhapete, süsivesikute, steroidide, antibiootikumide ja süsivesinike eraldamiseks ja uurimiseks. HPLC-l on segude eraldamise teiste meetoditega võrreldes palju eeliseid, näiteks suurem eraldusvõime ja kiirem analüüs. See kustutab vajaduse uuesti pakkida ja regenereerida ning pakub paremat kontrolli parameetrite üle ja suurendab seeläbi eraldamise tõhusust. Ideaalis sobib HPLC suuremahulisteks rakendusteks, kuna see suudab eraldada väga väikesed osakesed ja võimaldab kasutada kõrget rõhku, mis hõlbustab lahustite hõlpsat voolamist.

Joonis 01: HPLC kolonn

Lühidalt öeldes on HPLC tehnika töömeetod järgmine. Esiteks peaksime pumba abil proovi sisestama liikuva faasi voogudesse väikeste kogustena. Pumba rõhku tuleks hoida 40 MPa. See liikuva faasi voog perkoleerub läbi HPLC kolonni. Seejärel läbivad proovis olevad komponendid ka kolonni. Nende liikumiskiirus erineb siiski üksteisest, kuna erinevus proovikomponentide ja kolonni sees oleva adsorbendi vahel on erinev. Kutsume seda adsorbenti statsionaarseks faasiks, kuna see asub kolonni sees (ei liigu). Seejärel saame kolonni lõpus koguda kolonnist elueeruva proovi ja seeläbi saame proovis olevad komponendid eraldi koguda.

Mis on kiire HPLC?

Hiljuti töötasid Schering Ploomi teadusinstituudi teadlased välja kiire HPLC tehnika, mis on HPLC täiustatud versioon, kuna see võimaldab ühendite veelgi kiiremat eraldamist segust. Samuti tuntud kui kiire HPLC - see meetod kasutab 2,7-liitrise sulatatud südamikuga ränidioksiidi osakesi, mis saadakse 0,5-massilise poorse ränidioksiidi sulatamisel tahke ränidioksiidi osakestega. Need ainulaadselt valmistatud osakesed muudavad eraldamise väga kiireks ja seda ka madala vasturõhu korral, kui seda me kasutame HPLC-s.

Joonis 02: FPLC seade

Kiire HPLC annab tulemusi, mis on võrreldavad UPLC-ga, kuid teadlaste arvates on see tehnika parem, kuna see ei nõua väga kalleid ülikõrge rõhu seadmeid. Suurepärane on see, et kiire HPLC ei vaja uusi laboriprotokolle.

Mis vahe on HPLC ja kiire HPLC vahel??

HPLC on kõrgsurvevedelikkromatograafia ja kiire HPLC on kõrgsurvevedelikkromatograafia täiustatud vorm. Peamine erinevus HPLC ja kiire HPLC vahel on see, et pumba rõhk, mida kasutame HPLC jaoks, on umbes 40 MPa. Seevastu kiire HPLC korral on pumba rõhk umbes 3-5 MPa. Lisaks võime HPLC-meetodi abil eraldada erinevaid ühendeid nagu aminohapped, nukleiinhapped, süsivesikud, steroidid, antibiootikumid ja süsivesinikud, samal ajal kui kiiret HPLC-meetodit kasutatakse peamiselt valkude eraldamiseks.

Allpool toodud infograafik sisaldab lisateavet HPLC ja kiire HPLC erinevuse kohta.

Kokkuvõte - HPLC vs kiire HPLC

HPLC on vedelikkromatograafia tehnika, mis on muutunud kogu maailmas väga populaarseks. Kiire HPLC on HPLC uus versioon, Schering Plough Institute'i teadlased töötasid selle uue tehnika välja. Peamine erinevus HPLC ja kiire HPLC vahel on pumba rõhul, mida me eraldamiseks kasutame. See on; pumba rõhk, mida me kasutame HPLC jaoks, on umbes 40 MPa. Kuid kiire HPLC korral on pumba rõhk umbes 3-5 MPa.

Viide:

1. „Suure jõudlusega vedelikkromatograafia.“ Vikipeedia, Wikimedia Foundation, 20. oktoober 2018. Saadaval siin 
"Kiire HPLC käitamiseks on teil vaja väljamõeldud süsteemi - või on teil vaja?" Kiire HPLC - CHROMakadeemia. Saadaval siin  

Pilt viisakalt:

1. “HPLC kolom” Uks Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) via Commons Wikimedia  
2. „Lab's FPLC” - autor Stephen Helms, Dallas, TX, USA - Meie labori FPLC (CC BY-SA 2.0) Commonsi Wikimedia kaudu