Erinevus HPLC ja LCMS vahel

Peamine erinevus - HPLC vs LCMS
 

Enne HPLC ja LCMS erinevuste analüüsimist vaatame kõigepealt HPLC ja LCMS tähendust. Kromatograafia on keemilises analüüsis eraldamise meetod, kus proovi koostisosad eraldatakse kromatograafilises keskkonnas läbimisel. See hõlmab ka interaktsiooni proovi, statsionaarse ja liikuva faasiga. HPLC tähistab Suure jõudlusega vedelikkromatograafia, ja seda kasutatakse analüütilises keemias vedelikkromatograafia meetodina. Nende kombinatsioon Vedelikkromatograafia ja massispektroskoopia (LCMS) on välja töötatud valitud biomolekulide kvantitatiivseks analüüsiks ja nii see on HPLC-ga võrreldes väga tundlik, täpne ja spetsiifiline analüüsiprotseduur. See on oluline erinevus HPLC ja LCMC vahel. See artikkel tutvustab teile HPLC ja LCMC, mis tegelevad keemilise analüüsiga ja räägivad erinevustest HPLC ja LCMS vahel.

Mis on HPLC?

Populaarne on kõrgsurvevedelikkromatograafia (HPLC) lahutamismeetod analüütilises keemias. Peamiselt on kasutatakse komponentide eraldamiseks, segu iga komponendi identifitseerimiseks ja kvantifitseerimiseks. Varem oli seda meetodit tuntud kui kõrgsurvevedelikkromatograafia kuna see sõltus pumpadest, et voolata proovisegu sisaldav rõhu all olev vedel lahusti läbi tahke adsorbeeriva materjaliga täidetud kolonni. Proovisegu iga koostisosa interakteerub tahke adsorbendiga erinevalt, mille tulemuseks on erinevate koostisosade erinev voolukiirus. See võib viia koostisosade eraldumiseni, kui nad voolavad HPLC kolonnist välja.

HPLC on kasutatud mitme jaoks rakendused nagu näiteks D-vitamiini taseme analüüs veres, sportlaste ebaseaduslik uimastitarbimine tuvastades ravimijäägid nende uriinis, keeruka bioloogilise proovi koostisosade sortimine teadusuuringute ja analüüsi jaoks ning ravimite tootmine.

Mis on LCMS?

Vedelikkromatograafia-massispektromeetria (LCMS) on analüütiline tehnika, mis ühendab vedelikkromatograafia füüsikalise eraldamise võime massispektromeetria (MS) massianalüüsi võimetega. Vedelikkromatograafia on eraldusmeetod ja laetud osakeste massi ja laengu suhte analüüsimiseks kasutatakse massispektromeetriat. Füüsiline eraldamine saavutatakse tavaliselt HPLC abil ja alternatiivselt nimetatakse LCMS ka kui HPLC-MS. LCMS on a domineeriv analüüsimeetod sellel on a väga suur täpsus, tundlikkus ja spetsiifilisus võrreldes HPLC-ga. Seega on see kasulik paljudes rakendustes, näiteks uurimistöös, ravimianalüüsis, toiduanalüüsis jne. LCMS on peamiselt kasutatakse biokeemiliste omaduste eraldamiseks, tuvastamiseks, tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks konkreetse proovi keeruliste keemiliste segude juuresolekul.

Mis on vahet HPLC ja LCMC?

HPLC ja LCMC lühend ja määratlus

HPLC: HPLC tähistab kõrgtehnoloogilist vedelikkromatograafiat. See on eraldamistehnika, mida kasutatakse peamiselt komponentide eraldamiseks, segu iga komponendi tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks.

LCMS: LCMS tähistabVedelikkromatograafia ja massispektromeetria. See on analüütiline tehnika, mis ühendab vedelikkromatograafia füüsikalise eraldamise võime massispektromeetria (MS) massianalüüsi võimetega.

Omadused HPLC ja LCMC

Klassifikatsioon

HPLC: See on ainult vedelikkromatograafia meetod.

LCMS: See on vedelikkromatograafia ja massispektromeetria meetodi kombinatsioon.

Tõhusus

HPLC: Võrreldes LCMS-iga on HPLC analüüs vähem efektiivne ja aeglasem.

LCMS: Võrreldes HPLC-ga on LCMS-analüüs tõhus ja kiire.

Tundlikkus

HPLC: Võrreldes LCMS-iga on HPLC analüüs vähem tundlik.

LCMS: Võrreldes HPLC-ga on LCMS analüüs tundlikum.

Spetsiifilisus

HPLC: Võrreldes LCMS-iga on HPLC analüüs vähem spetsiifiline.

LCMS: Võrreldes HPLC-ga on LCMS analüüs täpsem.

Täpsus

HPLC: HPLC annab mõnede kemikaalide määramiseks vähem täpsed tulemused kui LCMS.

LCMS: LCMS annab mõnede kemikaalide määramiseks täpsemad tulemused kui HPLC.

Komponent

HPLC: HPLC võib pidada LCMS komponendiks.

LCMS: LCMS-i ei saa pidada HPLC komponendiks.

Iooniallikas

HPLC: Iooniallikat HPLC-seadmes ei eksisteeri.

LCMS: Iooniallikas on LCMS seadmes.

Rakendused

HPLC: Ioone, polümeere, orgaanilisi molekule ja biomolekule saab analüüsida HPLC abil.

LCMS: Orgaanilisi molekule ja biomolekule saab analüüsida. Vastupidiselt HPLC-le saab LCMS-i kasutada mittetäielikult eraldatud segude uurimiseks.

Operatsioon

HPLC: HPLC-seadme skeem on toodud joonisel 1 ja see sisaldab tavaliselt automaatse proovivõturi, pumbasid ja detektorit. Proovivõtja viib proovisegu liikuvasse faasi (lahustite, näiteks vee, atsetonitriili ja / või metanooli survestatud segu), mis kantakse selle kolonni. Pumbad tagavad kolonni kaudu soovitud liikuva faasi voolu ja koostise. Kolonn on täidetud adsorbendiga, mis on teraline tahke osake nagu räni või polümeerid. Detektor annab signaali, mis on proportsionaalne proovi koostisosa sisaldusega kolonnis, võimaldades seega valitud proovikoostisosade kvantitatiivset analüüsi. HPLC-seadet juhitakse ning andmete analüüsi pakub digitaalne mikroprotsessor ja kasutaja tarkvara.

Joonis 1: HPLC-seadme skeem

LCMS: LCMS-seadme skeem on toodud joonisel 2. Prooviekstrakt sisestatakse HPLC-st koosnevasse kolonni. Selles veerus säilitatakse proovi metaboliitide sisaldus füüsikaliste märkide alusel ja massispektromeetrisse voolavad erinevad metaboliidid erinevate ajavahemike järel. Massispektroskoopiat kasutatakse osakeste masside hindamiseks, molekuli elementaarse paigutuse määramiseks ja molekuli struktuuride selgitamiseks. Proov tuleks laetud molekulide genereerimiseks ioniseerida, et määrata nende massi ja laengu suhe. Seetõttu koosneb LCMS HPLC-instrumentide asemel veel kolmest moodulist, näiteks rauaallikast, massianalüsaatorist ja detektorist. Iooniallikas võib muuta gaasifaasi proovi ioonideks ja massianalüsaatoriks, mis rühmitab ioonid nende masside järgi elektromagnetiliste väljade abil. Lõpuks kvantifitseerib detektor proovis olevate ioonide väärtused ja edastab andmed nende kohta. LCMS-meetodit saab kasutada nii kvalitatiivsete kui ka kvantitatiivsete rakenduste jaoks.

  Joonis 2: LCMS-seadme skeem

Kokkuvõtteks võib öelda, et HPLC on vedelikkromatograafia meetod, samas kui LCMS on vedelikkromatograafia ja massispektromeetria kombinatsioon. Mõlemal analüüsimeetodil on erinevad omadused, kuid neid saab kasutada toidusegude, ravimite ja muude bioaktiivsete molekulide tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks.

Viited Arpino, P. (1992). Kombineeritud vedelikkromatograafia massispektromeetria. III osa. Termospreide rakendused. Massispektromeetria ülevaated, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. ja Spoendlin, C. (2004). Kiire pöördfaasilise kõrgfaasilise vedelikkromatograafia praktilised aspektid, milles kasutatakse farmaatsiatoodete väljatöötamisel ja tootmisel 3 μm osakestega pakitud kolonne ja monoliitseid kolonne, töötades praeguse hea tootmistava kohaselt. Kromatograafia ajakiri, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. ja Kerns, E. H. (1999). LC / MS rakendused ravimite väljatöötamisel. Massispektromeetria ülevaated, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Maatriksi abil laser desorptsiooni / ionisatsiooni sidumine vedelike eraldustega. Massispektromeetria ülevaated 16 (5): 283. Kujutis viisakalt: Originaali üleslaadija „Hplc” oli Kjaergaard saidil en.wikipedia - üle viidud saidist en.wikipedia. (Üldkasutatav) Commonsi kaudu