Erinevus HPLC ja HPTLC vahel

Peamine erinevus - HPLC vs HPTLC
 

Peamine erinevus HPLC ja HPTLC vahel on see HPLC võimaldab proovis komponentide kvantitatiivset eraldamist, samas kui HPTLC ei võimalda proovis komponentide kvantitatiivset eraldamist.

Kromatograafia on füüsikaline eraldusmeetod, mida kasutatakse segu komponentide eraldamiseks ja identifitseerimiseks. Nii HPLC kui ka HPTLC on kromatograafilised tehnikad. HPLC on kõrgsurvevedelikkromatograafia. HPTLC on suure jõudlusega õhukese kihi kromatograafia.

SISU

1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on HPLC
3. Mis on HPTLC
4. Kõrvuti võrdlus - HPLC vs HPTLC tabelina
5. Kokkuvõte

Mis on HPLC?

HPLC on kõrgsurvevedelikkromatograafia. See on analüüsimeetod, mida kasutatakse segu komponentide eraldamiseks, identifitseerimiseks ja kvantifitseerimiseks. Selle meetodi korral lahustatakse proov sobivas lahustis. Seejärel juhitakse lahusti koos prooviga läbi etteantud rõhuga pumba. Pump on täidetud tahke adsorbeeriva materjaliga. Siis seostuvad mõned komponendid tugevalt imava materjaliga, teised komponendid aga lõdvalt. See põhjustab komponentide erinevat voolukiirust läbi pumba. Seetõttu saab komponente hõlpsalt eraldada.

Joonis 01: HPLC-süsteem

Adsorbeerivat materjali, mis täidab pumba, nimetatakse statsionaarne faas. Lahustit koos lahustatud prooviga nimetatakse liikuvaks faasiks. Selles tehnikas kasutatavat pumpa nimetatakse kolonni. Kolonn on täidetud adsorbeeriva materjaliga, kõige sagedamini ränidioksiidi osakestega. Nende osakeste suurus võib olla vahemikus 2–50 μm. Eraldamise protsessi mõjutavad liikuva faasi koostis ja süsteemi temperatuur. Statsionaarse faasi ja proovis oleva komponendi vahelised interaktsioonid võivad olla hüdrofoobsed interaktsioonid, dipool-dipooli interaktsioonid, iooniline side jne..

HPLC töörõhk on tunduvalt kõrgem kui traditsioonilises vedelikkromatograafias. See asub umbes 50-350 baari. Vedelikkromatograafia ja HPLC erinevus on see, et vedelikkromatograafias langeb proov läbi kolonni raskusjõu mõjul, HPLC korral aga survestatakse proov läbi kolonni. Samuti on kolonni suurus ja absorbeerivad osakesed traditsioonilise vedelikkromatograafiaga võrreldes väga väikesed. HPLC tehnika abil eraldatud eraldusvõime on siiski parem.

Mis on HPTLC?

HPTLC on kõrgtehnoloogiline õhukese kihi kromatograafia. See on traditsioonilise TLC täiustatud ja automatiseeritud vorm. See meetod tagab tõhusa eraldusvõime lühikese aja jooksul. Selle analüüsimeetodi korral saab proovi ja võrdlusalust analüüsida samal ajal, mis võimaldab proovi võrrelda võrdlusalusega. See annab parema analüütilise täpsuse kui teised kromatograafilised tehnikad. Analüüsi jaoks kulub vähem aega. Tehnika on odav tehnika.

Joonis 02: toiduvärvide analüüs HPTLC abil

HPTLC meetod on lihtne protsess ja ka proovi ettevalmistamise etapp on välistatud (traditsioonilises TLC-s kaasatakse proovi ettevalmistamise etapp enne eraldamist. See etapp hõlmab puhastamist ja rikastamist). Lahustit saab kasutada otse ilma eeltöötluseta, ehkki muud kromatograafilised tehnikad vajavad eeltöötlust, näiteks degaseerimine, filtreerimine jne..

HPTLC-s kasutatav adsorbeeriv materjal on väga väikeste osakeste suurusega ränidioksiid. Traditsioonilises TLC-s on ränidioksiidi osakeste suurus 5-20 μm, samas kui HPTLC puhul on see 4-8 μm. Proov kantakse aplikaatori abil HPTLC plaadile. See annab ühtlase ja ohutu rakenduse. Seejärel asetatakse plaadid kambrisse, millel on liikuv faas. Kamber peaks olema liikuva faasi auruga küllastunud. Pärast HPTLC protsessi saab tuvastada kolinud kohti. Plaatide täppide tuvastamisel kasutab HPTLC meetod sobivat UV-piirkonda või joodikambrit.

Mis vahe on HPLC ja HPTLC vahel??

HPLC vs HPTLC

HPLC on kõrgsurvevedelikkromatograafia. HPTLC on suure jõudlusega õhukese kihi kromatograafia.
 Tehnika
HPLC-s juhitakse liikuv faas koos lahustiga läbi statsionaarse faasiga täidetud kolonni. HPTLC-s kantakse proov TLC-plaadile ja asetatakse liikuvat faasi sisaldavasse kambrisse; siis lastakse proovil liikuva faasiga plaadil ülespoole liikuda.
Mõõtmine
HPLC-s kasutatakse komponentide eraldamiseks proovis kolonni läbivate voolukiiruste erinevusi. HPTLC-s kasutatakse proovis olevate komponentide eraldamiseks proovi iga komponendi läbitud vahemaade erinevusi.
 Kvantitatiivne eraldamine
HPLC võimaldab proovides komponentide kvantitatiivset eraldamist. HPTLC ei võimalda proovis komponentide kvantitatiivset eraldamist.

Kokkuvõte - HPLC vs HPTLC

HPLC ja HPTLC on kaks kromatograafilist tehnikat. Peamine erinevus HPLC ja HPTLC vahel on see, et HPLC võimaldab proovis komponentide kvantitatiivset eraldamist, samas kui HPTLC ei võimalda proovis komponentide kvantitatiivset eraldamist.

Viide:

1. „Suure jõudlusega vedelikkromatograafia.“ Vikipeedia, Wikimedia Foundation, 10. aprill 2018, saadaval siin.
2. “HPTLC”. LinkedIn SlideShare, 30. mai 2011, saadaval siin.

Pilt viisakalt:

1. “HPTLCplatetoMS” Kjaergaardi koostatud ingliskeelses Vikipeedias - üle kantud en.wikipediast Commonsis (Avalik domeen) Commonsi Wikimedia kaudu
2. “Hplc” PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud MorlockAsociate professor (Privatdozentin) Hohenheimi ülikoolToitekeemia instituut - G. Morlock, C. Oellig, CAMAGi bibliograafiateenistus 103 (2009) Commons Wikimedia kaudu