Immunotsütokeemia (ICC) ja immunohistokeemia (IHC) on kaks molekulaardiagnostikas laialt kasutatavat tehnikat, mis tuvastab ja kinnitab nii mittenakkuslike kui ka nakkushaiguste esinemist rakkudel esinevate molekulaarsete markerite põhjal. Peamine erinevus immunotsütokeemias ja immunohistokeemias on molekul, mida kasutatakse nendes tehnikates analüüsiprotseduurina. ICC-s kasutatakse primaarseid ja sekundaarseid antikehi, mis on konjugeeritud selliste markeritega nagu fluorestsents, samal ajal kui IHC, monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi kasutatakse diagnostiliste määramiste jaoks.
1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on immunotsütokeemia
3. Mis on immunohistokeemia
4. Immunotsütokeemia ja immunohistokeemia sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - immunotsütokeemia vs immunohistokeemia tabelina
6. Kokkuvõte
ICC kasutab primaarseid ja sekundaarseid antikehi, mis on seotud markeritega nagu fluorestsentsmarkerid või ensüümid, ja see on võimas tuvastamismeetod sihtrakkudes esinevate antigeenide tuvastamiseks, mis võivad olla nakkuslikud rakuosakesed või vähkkasvaja rakud. Immunotsütokeemia jaoks on vaja kolme tüüpi kontrolle.
Joonis 01: Immunotsütokeemia märgistab rakkudes sisalduvaid valke (türosiini hüdroksülaas sümpaatiliste autonoomsete neuronite aksonites on näidatud roheliselt).
Esmane antikehakontroll on spetsiifiline iga uue antikeha suhtes ja seda ei saa korrata iga katsega. Antikehade sekundaarne kontroll on kavandatud katses kasutatud primaarsete antikehade põhjal ja see lisatakse igasse katsesse. Märgistuskontroll on lisatud juhul, kui protseduuri tingimust või proovi muudetakse või kui leitakse ootamatu märgistus.
ICC kaks peamist rakendust on raadioimmuuring (RIA) ja ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs (ELISA). Kõige tavalisem antikeha, mida kasutatakse, on immunoglobuliin G.
Immunohistokeemias sisaldab lähteproov monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi, et teha kindlaks antigeenide olemasolu võõrastes rakkudes. See meetod põhineb antigeeni ja antikeha seondumise spetsiifilisel reaktsioonil. Tuvastamiseks kasutatud antikehad saab märgistada erinevate markeritega; need võivad olla fluorestsentsmarkerid, radiomärgistatud markerid või keemilised markerid. Läbi hõlbustamise in vitro antigeeni ja sihtmärk-antikeha vahelise seondumise abil saab kindlaks teha raku konkreetse valgu olemasolu või puudumise.
Joonis 02: Normaalse neeru immunohistokeemiline värvumine CD10-ga
Praegu tegelevad teadlased rakkudes leiduvate spetsiifiliste antigeenide sihtantikehade väljatöötamisega, mis võivad areneda kas pahaloomuliste kasvajarakkudena, või antigeenide suhtes, mis esinevad nakkusetekitajates nagu HIV.
Immunotsütokeemia (ICC) vs immunohistokeemia (IHC) | |
ICC kasutab primaarsete ja sekundaarsete antikehadega seotud markereid, näiteks fluorestsentsmarkereid või ensüüme, ja see on võimas detekteerimismeetod sihtrakkudes esinevate antigeenide tuvastamiseks. | IHC on meetod, mis kasutab monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi nende antigeenide olemasolu kindlakstegemiseks, mis on rakupindadele asetatud spetsiaalsed valgu markerid. |
Prooviallikas | |
ICC-s kasutatakse proove, mis on saadud kudedest, mis on histoloogiliselt töödeldud õhukesteks osadeks. | IHC kasutab proove, mis koosnevad ühekihilistes rakkudes kasvatatud rakkudest või suspensioonis olevatest rakkudest, mis asetatakse slaidile. |
Proovi töötlemine | |
ICC-s peaksid rakud olema läbilaskvad, et hõlbustada antikehade tungimist rakusisestesse sihtmärkidesse. | IHC-s kinnitatakse rakud enne värvimist formaliiniga fikseeritud ja manustatud parafiiniga. |
Rakkudes leiduvate molekulaarsete markerite põhjal kasutatakse nii mittenakkuslike kui ka nakkushaiguste esinemise tuvastamiseks ja kinnitamiseks molekulaardiagnostikat. Molekulaarsed markerid võivad olla valgud või DNA või RNA järjestused; selliste tehnoloogiate nagu ICC ja IHC arendamine on sillutanud teadlastele teed haiguse ja selle põhjuse varajases staadiumis tuvastamiseks. Nii ICC kui ka IHC sõltuvad spetsiifilistest antikeha ja antigeeni vahelistest reaktsioonidest, ehkki proovi allikast. Peamine erinevus immunotsütokeemia ja immunohistokeemia vahel on kahe protseduuri proovide töötlemine.
Selle artikli PDF-versiooni saate alla laadida ja seda võrguühenduseta otstarbel kasutada tsitaatide märkuse kohaselt. Laadige alla PDF-versioon siit. Immunotsütokeemia ja immunohistokeemia erinevus.
1. Burry, Richard W. “Immunotsütokeemia kontroll: värskendus”. Histokeemia ja tsütokeemia ajakiri, SAGE Publications, jaanuar 2011, saadaval siin. Juurdepääs 24. augustil 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha jt. "Immunohistokeemia rakendused." Ajakiri Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, august 2012, saadaval siin. Juurdepääs 24. augustil 2017.
1. Swhardeni “Immunohistokeemia” - Oma töö (CC BY-SA 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu
2. Neerron “Neeru cd10 ihc” - Omad tööd (CC BY-SA 3.0) Commonsi Wikimedia kaudu