Uurimisvaldkond on võtnud suure pöörde raku kultiveerimise kasutuselevõtu ja rakuliinide kasutamisega teadusuuringutes. Raku käitumise hindamiseks tehakse kunstlikult valmistatud rakkude ja rakuliinidega erinevad testid. Enamik inimestel põhinevaid uuringuid nõuab tulemuste kinnitamiseks rakukultuuri ja rakuliinide kasutamist, eriti kui teadusuuringud põhinevad farmakoloogial ja ravimite avastamisel. Primaarne rakukultuur on kultuur, mis on valmistatud rakkude otsese eraldamise teel mehaaniliste või ensümaatiliste meetodite abil. Rakuliin valmistatakse primaarse rakukultuuri pideva läbilaskmise teel, et saada homoloogseid märke omandanud rakuliin. võtme erinevus primaarse rakukultuuri ja rakuliini vahel on arv, mitu korda neil kõigil on. Primaarne rakukultuur eraldatakse otse, samal ajal kui rakuliin valmistatakse primaarse rakukultuuri mitu korda läbi laskmise teel.
1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on esmane rakukultuur
3. Mis on rakuliin
4. Primaarse rakukultuuri ja rakuliini sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - esmane rakukultuur vs rakuliin tabelina
6. Kokkuvõte
Primaarne rakukultuur on rakukultuuripreparaat, eraldades rakud mehaaniliste või ensümaatiliste meetoditega otse allikast. Rakud eraldatakse trüpsiinimise või mittetüpsiniseerimise meetoditega. Primaarseid rakukultuure kasvatatakse sobivas kasvukeskkonnas, mis sisaldab kasvufaktoreid, hormoone, lipiide ja muid määratlemata komponente. Teatud meediumitele peab olema lisatud seerum. Sööde tagab kasvutingimuste optimeerimise ja rakud püsivad optimaalsetes tingimustes. Rakke saab trüpsiini abil eraldada erinevatest koeallikatest, näiteks maksa või endoteeli ja närvikoest inimestel või kõrgematel loomadel.
Rakkude taimedest ja mikroorganismidest eraldamisel kasutatakse spetsiaalseid ekstraheerimisprotseduure, milles kasutatakse nii mehaanilisi kui ka keemilisi meetodeid. Neid eraldatud rakke saab immobiliseerida tahkele alusele või neid saab mitu põlvkonda passaažiks rakuliiniks arendada.
Primaarsed rakukultuurid on peamiselt kahte tüüpi; Külgnevad rakukultuurid ja suspensioonrakukultuurid. Järgmised primaarsed rakukultuurid on kinnituspunktist sõltuvad ja kasvu jaoks on vaja tugevat tuge. Nakkuvad primaarsed rakukultuurid saadakse peamiselt kudedest või elunditest. Suspensiooni primaarsed rakukultuurid on kinnituspunktist sõltumatud ja nad kasvavad vedelas keskkonnas. Suspensioonikultuure tuleb kasvufaasis pidevalt loksutada. Primaarsed suspensioonrakukultuurid võivad olla sirgelt saadud verest.
Primaarsete rakukultuuride eluiga on suhteliselt lühem, kuid teave punkti primaarsete rakukultuuride kohta in vitro tingimused loovad aluse paljudele uuringutele. Need on kasulikud rakkude omaduste, nii morfoloogilise kui ka keemilise käitumise uurimiseks.
Rakuliinid on teadusuuringutes laialdaselt kasutusel ja praegu on rakuliinid, näiteks vähirakuliinid, maksarakuliinid ja neerurakuliinid, teadusuuringute jaoks kaubanduslikult saadaval. Rakuliinid valmistatakse primaarse rakukultuuri pideva läbimise abil. Passaaž tähendab subkultuuride kasvatamise protsessi, mille käigus rakukultuurid arendatakse rakuliiniks. Need rakuliinid on kahemõõtmeliste või kolmemõõtmeliste maatriksite kultuurid, mida hoitakse rakuliinidena.
Rakuliinid klassifitseeritakse piiratud ja pidevateks rakuliinideks. Piiratud rakuliinid läbitakse kindel arv läbikäike (20–30 lõiku). Pärast vajaliku arvu lõikude läbimist siseneb rakuliin vananemisfaasi. Neid rakke on lihtne käsitseda, kuna nende kasv on kindel. pidevad rakuliinid nimetatakse ka immortaliseeritud rakuliinid. Nendel rakuliinidel puudub kindel arv läbikäike. Nad kasvavad määramata aja jooksul ja on seega võimelised omandama mutatsioone. Seetõttu on pidevad rakuliinid kergesti muteeruvad ja seetõttu muutuvad nad erinevalt lõplikest rakuliinidest oma morfoloogilistes ja geneetilistes omadustes.
Joonis 01: rakuliin
Rakuliine kasutatakse seetõttu, et see on mugavam kui primaarse rakukultuuri kasutamine, kuna neid saab teatud aja jooksul ikka ja jälle kasutada. Kuid see on rohkem altid mutatsioonidele ja saastumisele, kuna nende vohamine on suurenenud.
Primaarne rakukultuur vs rakuliin | |
Primaarne rakukultuur on kultuur, mis on valmistatud rakkude otsese eraldamise teel mehaaniliste või ensümaatiliste meetoditega. | Rakuliin valmistatakse primaarse rakukultuuri pideva läbilaskmise teel, et saada homoloogseid märke omandanud rakuliin. |
Läbipääsude arv | |
Primaarseid rakukultuure ei passeerita, rakke hoitakse kultuuritingimustes. | Rakuliinid valmistatakse passiivselt või määramata ajaks. |
Tüübid | |
Adherentne primaarne rakukultuur ja suspensiooni primaarne rakukultuur on primaarsete rakukultuuride kaks tüüpi. | Piiratud rakuliin ja pidev rakuliin on kahte tüüpi rakuliinid. |
Eluaeg | |
Primaarsete rakukultuuride eluiga on lühike. | Rakuliinide eluiga on pikem. |
Primaarseid rakukultuure ja rakulinde kasutatakse uuringutes laialdaselt, et uurida erinevate rakkude käitumisharjumusi erinevates tingimustes ja erinevatel farmakoloogilistel aspektidel. Primaarsed rakukultuurid eraldatakse otse lähteorganist või -koest ja kasvatatakse söötmel. Tingimused on optimeeritud konkreetsete rakkude kasvu jaoks. Rakuliinid, vastupidiselt, valmistatakse primaarsete rakukultuuride läbilaskmisega piiratud või lõpmatu arv kordi. Rakuliinid on kaubanduslikult saadaval ja teadlaste seas populaarsed kasutamise lihtsuse tõttu.
1.Lonza, Primaarsed rakud vs rakuliinid. Saadaval siin
1. "Inimrakkude koloonia kloonitakse in vitro kloonimisrõngaste abil" Autor: Paphrag (CC BY-SA 2.5), Commons Wikimedia