Erinevus pöördfaasi ja normaalfaasi HPLC vahel

võtme erinevus pöördfaasi ja normaalfaasi HPLC vahel on see, et pöördfaasi HPLC kasutab polaarset statsionaarset faasi ja vähempolaarset liikuvat faasi, samas kui tavalise faasi HPLC kasutab mittepolaarset statsionaarset faasi ja polaarset liikuvat faasi.

Tavalise faasi HPLC on HPLC vanim tehnika, mida Tswett kasutas taimeekstraktide eraldamisel; ta kasutas kriidis klaaskolonni. See oli klassikaline kromatograafia režiim, mis viis selle nimetamiseni “normaalseks” tehnikaks. Pöördfaasiline HPLC on seevastu tavalisele tehnikale vastupidine, mida teadlased hiljuti välja töötasid.

SISU

1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on pöördfaasi HPLC
3. Mis on normaalfaasi HPLC
4. Kõrvuti võrdlus - pöördfaas vs normaalfaasiline HPLC tabelina
5. Kokkuvõte

Mis on pöördfaasi HPLC?

Pöördfaasi HPLC on kromatograafiline tehnika, milles kasutame statsionaarset hüdrofoobset faasi. Kõigist HPLC meetoditest kasutame seda meetodit umbes 70% ulatuses, kuna see on laialdaselt kasutatav ja reprodutseeritav. Statsionaarne faas on mittepolaarne ja liikuv faas on polaarne.

Enamasti kasutavad teadlased liikuva faasina veepõhist segu seguneva, polaarse orgaanilise lahustiga, näiteks atsetonitriili või metanooliga. Seetõttu interakteeruvad analüütid mittepolaarse statsionaarse faasiga.

Mis on normaalfaasi HPLC?

Tavalise faasi HPLC on kromatograafiline tehnika, milles kasutame hüdrofiilset statsionaarset faasi. See on HPLC traditsiooniline meetod, ehkki me ei kasuta seda nii palju. Statsionaarne faas on polaarne ja liikuv faas on mittepolaarne. Veelgi olulisem on, et selle tehnika liikuv faas on 100% orgaaniline. See tähendab, et selleks ei kasutata vett.

Joonis 01: normaal- ja pöördfaasi HPLC kromatogrammide prooviprofiil vastavalt analüüdi komponentide polaarsusele.

Tavaliselt sisaldab statsionaarne faas ränidioksiidi, tsüano, diooli, aminorühmaga seotud faase jne. Liikuvad faasid hõlmavad orgaanilisi lahusteid nagu heksaan, etüülatsetaat jne. See meetod põhineb lahusti või analüüdi molekulide peetumisel statsionaarsele polaarsele faasile..

Mis vahe on pöördfaasi ja normaalfaasi HPLC vahel??

Pöördfaasi HPLC on kromatograafiline tehnika, milles kasutame statsionaarset hüdrofoobset faasi. Selle tehnika statsionaarne faas on mittepolaarne. Statsionaarne faas on mittepolaarne, samas kui liikuv faas on polaarne. Pealegi kasutavad teadlased pöördfaasi HPLC liikuva faasina vee vesisegu ja seguneva, polaarse orgaanilise lahustiga, näiteks atsetonitriili või metanooliga. Kui normaalfaasi HPLC on kromatograafiline meetod, milles kasutame hüdrofiilset statsionaarset faasi. Selle tehnika statsionaarne faas on polaarne. Statsionaarne faas on polaarne, samas kui liikuv faas on mittepolaarne. Lisaks kasutavad teadlased normaalfaasi HPLC liikuva faasina orgaanilisi lahusteid nagu heksaan, etüülatsetaat jne. Allpool toodud infograafik kajastab pöördfaasi ja normaalfaasi HPLC erinevust tabelina.

Kokkuvõte - pöördfaas vs normaalfaas HPLC

Pöördfaasi ja normaalfaasi HPLC meetodid on kaks vedelikkromatograafilist meetodit. Erinevus pöördfaasi ja normaalfaasi HPLC vahel on see, et pöördfaasi HPLC kasutab polaarset statsionaarset faasi ja vähem polaarset liikuvat faasi, samas kui normaalse faasi HPLC kasutab mittepolaarset statsionaarset faasi ja polaarset liikuvat faasi.

Viide:

1. Veed. “HPLC eraldusrežiimid.” HPLC - kõrgefektiivse vedelikkromatograafia selgitus: veed. Saadaval siin